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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液pcr一直得不到目的条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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w5239775hj

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液pcr一直得不到目的条带 已有4人参与

第一次菌液pcr如下图所示，第二次菌液pcr连条带都没有，问题到底出在哪里？？？

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-04-24 20:29:26
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by CarlJH at 2016-04-25 14:55:16
不管你是通用引物还是特异引物，也不会假阳性率很高啊，有没有带一目了然
...

连接转化完做菌落PCR无论用什么引物，假阳性率都高。因为在菌落位置会有高拷贝数的没有被整合到载体上的目的片段，也会有连接成功但是没有成功转化的重组质粒。这是为什么要引入质粒PCR鉴定和双酶切鉴定。
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17楼2016-04-25 20:35:43
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)
怎么看不见图

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2楼2016-04-24 23:31:32
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)
菌液pcr一直得不到目的条带

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3楼2016-04-24 23:32:20
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)
菌液pcr一直得不到目的条带-1

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4楼2016-04-24 23:32:32
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