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新虫 (初入文坛)

[求助] 菌液pcr一直得不到目的条带 已有4人参与

第一次菌液pcr如下图所示,第二次菌液pcr连条带都没有,问题到底出在哪里???

@biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by CarlJH at 2016-04-25 14:55:16
不管你是通用引物还是特异引物,也不会假阳性率很高啊,有没有带一目了然
...

连接转化完做菌落PCR无论用什么引物,假阳性率都高。因为在菌落位置会有高拷贝数的没有被整合到载体上的目的片段,也会有连接成功但是没有成功转化的重组质粒。这是为什么要引入质粒PCR鉴定和双酶切鉴定。
17楼2016-04-25 20:35:43
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)

2楼2016-04-24 23:31:32
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)

3楼2016-04-24 23:32:20
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鱼鱼魏魏

新虫 (小有名气)

4楼2016-04-24 23:32:32
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