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蜜蜂wyh

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助求助多糖含量 已有2人参与

我最近在做多糖含量测定,测出吸光度之后,用标准曲线求出浓度了,现在不知道含量还怎么求了,求大神,必有重谢

@lifeliuyan 发自小木虫Android客户端
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蜜蜂wyh

新虫 (初入文坛)

2楼2016-04-24 07:53:00
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york6999

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
苯酚-硫酸法

1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置20分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。
2.样品含量测定:
①取样品1克(湿样)加1ml 15%TCA溶液研磨,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液于10毫升离心管中,再加少许5%TCA溶液研磨,倒上清液,重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意:总的溶液不要超出10毫升。(既不要超出离心管的容量)。
②离心,转速3000转/分钟,共三次。第一次15分钟,取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。(测肝胰腺样品时,每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。)
③水浴,在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀,在96℃水浴锅中水浴2小时。
④定容取样。水浴后,用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液,以蒸馏补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。
3楼2016-04-24 09:39:58
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yuyanbaby

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用你测出的吸光度带入葡萄糖的标准曲线计算出你多糖中葡萄糖的浓度,再用算出的葡萄糖浓度除以你多糖中的总浓度。就是多糖含量
没有壹種困難,是成爲妳放棄的理由。
4楼2016-04-26 14:05:13
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蜜蜂wyh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyanbaby at 2016-04-26 14:05:13
用你测出的吸光度带入葡萄糖的标准曲线计算出你多糖中葡萄糖的浓度,再用算出的葡萄糖浓度除以你多糖中的总浓度。就是多糖含量

我用的cdf/w,用不用在乘以多糖液体积呢

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5楼2016-04-26 22:09:19
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