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1379452403

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR体系

PCR体系一般根据什么确定啊,10,20,50ul体系有什么不同啊,其中的各个温度和时间怎么确定啊,都依据什么啊,跪求大神指导啊,小菜鸟跪求啊

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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
对于一般的PCR程序,有两个参数很重要,一个是退火温度,这个与PCR引物有关,一般设置在引物Tm与(Tm-5)范围内;另一个是延伸时间,这个与产物大小有关,对于普通Taq酶,按每分钟1kb计算,可以稍长但不能短,对于特殊的快酶则视具体情况而定。
6楼2016-04-22 18:46:29
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半仙0356

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看你自己要做多少东西咯,

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2楼2016-04-22 16:34:14
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red-bri

新虫 (小有名气)

看你的目的,一般检测下,20ul足够,要是回收条带的话,50ul。

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3楼2016-04-22 17:08:38
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1379452403

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 半仙0356 at 2016-04-22 16:34:14
看你自己要做多少东西咯,

时间怎么设呢,跟酶有关吗

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4楼2016-04-22 18:39:20
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