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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR体系
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1379452403

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR体系

PCR体系一般根据什么确定啊，10，20，50ul体系有什么不同啊，其中的各个温度和时间怎么确定啊，都依据什么啊，跪求大神指导啊，小菜鸟跪求啊

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1楼 2016-04-22 15:57:12
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对于一般的PCR程序，有两个参数很重要，一个是退火温度，这个与PCR引物有关，一般设置在引物Tm与（Tm-5）范围内；另一个是延伸时间，这个与产物大小有关，对于普通Taq酶，按每分钟1kb计算，可以稍长但不能短，对于特殊的快酶则视具体情况而定。
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6楼2016-04-22 18:46:29
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半仙0356

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看你自己要做多少东西咯，

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2楼2016-04-22 16:34:14
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red-bri

新虫 (小有名气)
看你的目的，一般检测下，20ul足够，要是回收条带的话，50ul。

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3楼2016-04-22 17:08:38
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1379452403

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 半仙0356 at 2016-04-22 16:34:14
看你自己要做多少东西咯，

时间怎么设呢，跟酶有关吗

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4楼2016-04-22 18:39:20
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