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13steve

银虫 (初入文坛)

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专业: 农业昆虫学

[求助] 无缝克隆新手求助已有1人参与

请问有没有做过无缝克隆的，我做第一步PCR就跑不出条带来，引物也是按照全式金说明书上设计的，引物有40多bp吧，跑梯度都报不出来，请问有哪里出现问题了吗，谢谢

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1楼 2016-04-19 16:03:17

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gastrodia

金虫 (正式写手)

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如果引物没问题，把与变形的时间增加为98度2min,最好不要用全式金的酶扩增，宝生物有一款gFLEX

发自小木虫Android客户端

4楼2016-11-22 08:17:17

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飞鸟向前

新虫 (初入文坛)

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专业: 环境微生物学

引物设计有问题么？

2楼2016-11-21 13:33:58

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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)

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去了同源臂后的短的引物能不能P出来呢? 这个情况我也出现过，1.我是换引物了，2.我把底物浓度增加了

竹杖芒鞋轻胜马，谁怕，一蓑烟雨任平生；回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴

3楼2016-11-21 22:24:44

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Luna77Luna77

铜虫 (初入文坛)

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专业: 肿瘤复发与转移

【答案】应助回帖

请问楼主解决了么，我最近也有这个问题

5楼2016-12-05 20:18:51

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