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13steve

银虫 (初入文坛)

[求助] 无缝克隆新手求助已有1人参与

请问有没有做过无缝克隆的,我做第一步PCR就跑不出条带来,引物也是按照全式金说明书上设计的,引物有40多bp吧,跑梯度都报不出来,请问有哪里出现问题了吗,谢谢
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飞鸟向前

新虫 (初入文坛)

引物设计有问题么?
2楼2016-11-21 13:33:58
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)

去了同源臂后的短的引物能不能P出来呢? 这个情况我也出现过,1.我是换引物了,2.我把底物浓度增加了
竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
3楼2016-11-21 22:24:44
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gastrodia

金虫 (正式写手)

如果引物没问题,把与变形的时间增加为98度2min,最好不要用全式金的酶扩增,宝生物有一款gFLEX

发自小木虫Android客户端
4楼2016-11-22 08:17:17
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Luna77Luna77

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主解决了么,我最近也有这个问题
5楼2016-12-05 20:18:51
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