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无缝克隆新手求助
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13steve
银虫
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性别: GG
专业: 农业昆虫学
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求助
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无缝克隆新手求助
已有1人参与
请问有没有做过无缝克隆的,我做第一步PCR就跑不出条带来,引物也是按照全式金说明书上设计的,引物有40多bp吧,跑梯度都报不出来,请问有哪里出现问题了吗,谢谢
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1楼
2016-04-19 16:03:17
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飞鸟向前
新虫
(初入文坛)
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虫号: 1680795
注册: 2012-03-10
专业: 环境微生物学
引物设计有问题么?
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2楼
2016-11-21 13:33:58
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MAS_rice
至尊木虫
(著名写手)
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虫号: 3859702
注册: 2015-05-09
性别: GG
专业: 植物营养学
去了同源臂后的短的引物能不能P出来呢? 这个情况我也出现过,1.我是换引物了,2.我把底物浓度增加了
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竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
3楼
2016-11-21 22:24:44
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gastrodia
金虫
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(小学生)
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帖子: 726
在线: 71小时
虫号: 384091
注册: 2007-05-27
性别: GG
专业: 微生物遗传育种学
如果引物没问题,把与变形的时间增加为98度2min,最好不要用全式金的酶扩增,宝生物有一款gFLEX
发自小木虫Android客户端
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4楼
2016-11-22 08:17:17
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Luna77Luna77
铜虫
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虫号: 2574650
注册: 2013-07-31
性别: GG
专业: 肿瘤复发与转移
【答案】应助回帖
请问楼主解决了么,我最近也有这个问题
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5楼
2016-12-05 20:18:51
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