24小时热门版块排行榜    

查看: 2717  |  回复: 29

dinosaurfly

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可能有两种情况,一是你的流动相pH值偏高,你的色谱柱是否耐受,如果不耐受,柱子固定相被破坏就惨了;二是你的样品过滤吗,柱子压力与上次试验比较是不是明显增大了,柱头污染也会造成这种情况!
酒困路长惟欲睡,日高人渴漫思茶!
21楼2016-04-19 08:47:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

相信永恒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 416301116 at 2016-04-18 19:06:37
按照平常的冲洗方式,时间加倍,在用纯的有机相冲洗,因为纯的有机相洗脱的能力是最强的,容易把聚集在柱头的脏东西冲洗下来,你可以在冲洗的时候,把色谱柱反接。
你也可以试一下把柱子倒过来使用一下,看看峰型 ...

色谱柱轻易不要反接,对柱子不好!
22楼2016-04-19 09:17:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

416301116

木虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 相信永恒 at 2016-04-19 09:17:34
色谱柱轻易不要反接,对柱子不好!...

根据品牌的不同,是可以反接的,根据我的经验,好多峰型不好或者分离度变差的色谱柱,在反过来使用后,都会变好一些的。其实色谱柱没有想象中的那么脆弱的,不好的柱子反过来使用,这是变废为宝。
加油
23楼2016-04-19 12:26:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逸影冰

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by dinosaurfly at 2016-04-19 08:47:01
可能有两种情况,一是你的流动相pH值偏高,你的色谱柱是否耐受,如果不耐受,柱子固定相被破坏就惨了;二是你的样品过滤吗,柱子压力与上次试验比较是不是明显增大了,柱头污染也会造成这种情况!

进的是标准品,已过滤。流动相pH不是一般要比样品pKa大或小2个单位吗?但是我的标准品不同浓度的pH还不一样,,
24楼2016-04-20 18:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dinosaurfly

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
24楼: Originally posted by 逸影冰 at 2016-04-20 18:28:50
进的是标准品,已过滤。流动相pH不是一般要比样品pKa大或小2个单位吗?但是我的标准品不同浓度的pH还不一样,,...

标准品配样是用的纯甲醇吗,如果配样溶剂和流动相不一致也会造成这种情况,当然你第一天这是这么配制的对吧,如果是基本排除了这个因素;另一个就是你的柱效下降了,pH1.5-9的色谱柱确实不太适合pH9的流动相长期使用,最好柱子的耐受pH值最高在10或12较好;我想知道你用的流动相是配在一块还是单独放在两个瓶子里呢,如果pH9的磷酸盐单独放在一个流动相瓶中,一天时间内连续进样磷酸盐可能会长菌,造成色谱柱柱头污染,那么这样也会造成峰分叉的情况;至于过滤的问题,以前对照品和样品都过滤吗,特别是样品,如果不过滤也会造成色谱柱污染,柱效下降!
酒困路长惟欲睡,日高人渴漫思茶!
25楼2016-04-21 08:59:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逸影冰

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
25楼: Originally posted by dinosaurfly at 2016-04-21 08:59:27
标准品配样是用的纯甲醇吗,如果配样溶剂和流动相不一致也会造成这种情况,当然你第一天这是这么配制的对吧,如果是基本排除了这个因素;另一个就是你的柱效下降了,pH1.5-9的色谱柱确实不太适合pH9的流动相长期使 ...

流动相是分开放的,每天的缓冲液都会新配,样品和对照品也都会过滤。现在是标准品出峰都不正常了。
26楼2016-04-21 09:21:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dinosaurfly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by 逸影冰 at 2016-04-21 09:21:22
流动相是分开放的,每天的缓冲液都会新配,样品和对照品也都会过滤。现在是标准品出峰都不正常了。...

流动相分开放,样品序列是过夜批处理吗,如果一天之内长时间进样,磷酸盐应该会长菌,造成色谱柱污染,柱压升高没有呢,如果明显升高了那么肯定是污染了,柱效下降是必然的
酒困路长惟欲睡,日高人渴漫思茶!
27楼2016-04-22 08:41:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逸影冰

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by dinosaurfly at 2016-04-22 08:41:28
流动相分开放,样品序列是过夜批处理吗,如果一天之内长时间进样,磷酸盐应该会长菌,造成色谱柱污染,柱压升高没有呢,如果明显升高了那么肯定是污染了,柱效下降是必然的...

调节pH后出峰正常了,但是柱压在同一天内从210bar上升到最高有290bar,是因为磷酸盐长菌了吗?当天新配的,这么快就可能长菌?
28楼2016-05-06 08:46:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dinosaurfly

木虫 (正式写手)

引用回帖:
28楼: Originally posted by 逸影冰 at 2016-05-06 08:46:27
调节pH后出峰正常了,但是柱压在同一天内从210bar上升到最高有290bar,是因为磷酸盐长菌了吗?当天新配的,这么快就可能长菌?...

是的,磷酸盐是特别容易长菌的,特别是夏天,,温度高,最好用棕色瓶盛放,如果跟有机相配在一块最好了!

发自小木虫Android客户端
酒困路长惟欲睡,日高人渴漫思茶!
29楼2016-05-07 08:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

642901219

新虫 (小有名气)

30楼2016-05-07 08:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 逸影冰 的主题更新
信息提示
请填处理意见