24小时热门版块排行榜    

查看: 7577  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 求救,NEB的Q5高保真酶扩增出现问题 已有2人参与

各位大神,如题:我用普通的Taq酶扩增目的片段1.6Kb左右,可以扩出,且比较亮,但是下方有些非特异带。换用NEB的Q5高保真酶,同样的条件,就啥也没有了,体系和程序用的说明书推荐的;以前看过虫友遇到过这种问题,没想到今天自己也遇到了,想问问大家的都最后如何解决的啊?交流一下吧。郁闷啊
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqqlb

铁虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+2 2016-04-10 09:39:36
尝试下降低模板的浓度

发自小木虫Android客户端
明确目标牵引能量 行之所想 会有所得
6楼2016-04-09 00:30:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lwk5716: 金币+5 2016-04-08 10:05:22
适当降低退火温度试试吧

发自小木虫Android客户端
2楼2016-04-07 23:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-07 23:36:23
适当降低退火温度试试吧

今天准备做个温度梯度试试,谢啦。
3楼2016-04-08 10:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-04-07 23:36:23
适当降低退火温度试试吧

我还想问您个问题,那就是有人说可以把普通Taq酶和高保真的酶混合起来扩增,可以提高效率,也能有保真性,您知道比例吗?可以这么干吗?扩出来的是加A尾巴的吗?
4楼2016-04-08 21:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +3 举个栗子oi 2026-03-24 4/200 2026-03-26 20:49 by sanrepian
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 321求调剂 +3 璞玉~~ 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:07 by Zhanglab-TJU
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见