应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 如何去找BL21(DE3)中的单拷贝基因
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 2120  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

张鑫1373

银虫 (小有名气)

[求助] 如何去找BL21(DE3)中的单拷贝基因 已有1人参与

我要测定以BL21(DE3)为受体菌中所含的重组质粒拷贝数，根据荧光定量PCR可以进行测定质粒拷贝数，不过需要BL21(DE3)中的单拷贝基因做内参，所以求求各位神虫，不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-04-06 21:14:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noblefire

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-04-10 23:01:24
这个菌株已经全基因组测序了，你做质粒的拷贝数一定用的是DNA作为模板，而不是cDNA，所以可以说除了rRNA gene和极少数的基因之外都是单拷贝的，你从NCBI上面下载BL21（DE3）的基因组随便找个基因就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2016-04-07 08:58:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)
BL21(DE3)全基因组在NCBI上我也查到了，我担心正好随机选上的基因正好是多拷贝

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-04-07 11:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noblefire

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张鑫1373 at 2016-04-07 11:36:56
BL21(DE3)全基因组在NCBI上我也查到了，我担心正好随机选上的基因正好是多拷贝

基本上不可能，如果你有基因组序列了，可以在设计引物完成之后全基因组比对一下引物的特异性，如果特异性都没有问题那么就不可能出现多拷贝。
赞一下 回复此楼
4楼2016-04-08 07:32:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)
BL21(DE3)的全基因组数据在NCBI上找到了，不过是以单个的基因分开说明的，若要用引物比对，则需要将单个基因重新按照碱基排序从1、2、3…… 到最后进行排列，排列完之后再在基因组序列上找引物的结合位点，观察一对引物是否只有1个结合部位，若是，则证明是染色体上的单拷贝基因。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-04-08 23:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

602059625

金虫 (知名作家)
人为插入的T7 RNA polymerase gene肯定是单拷贝
赞一下 回复此楼
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
6楼2016-04-10 18:59:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noblefire

铁虫 (小有名气)
肯定能下载到全序列，在ncbi下载右侧可以选择。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-04-11 13:19:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)
能给做一个在NCBI中查找并下载大肠杆菌BL21(DE3)全基因组序列的详细操作步骤吗？谢谢各位神虫

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-19 08:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张鑫1373 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602调剂 初试总分335 +6 19123253302 2026-04-04 6/300 2026-04-04 20:31 by imissbao
[考研] 278求调剂 +3 依旧！ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718！ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 085600材料与化工调剂 +26 kikiki7 2026-03-30 27/1350 2026-04-04 09:18 by qlm5820
[考研] 271分求调剂学校 +11 zph158488！ 2026-04-02 11/550 2026-04-04 01:06 by userper
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 一志愿华东理工大学，080500学硕，317分，求调剂 +13 s1145 2026-03-31 15/750 2026-04-03 11:44 by msi123
[考研] 338求调剂，一志愿能源动力，外语是日语203 +5 zzz，，r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 14:08 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 【求调剂】新能源材料本科，一志愿211，初试321 +6 求调剂学校， 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 08工科275求调剂，可跨考。 +5 AaAa7420 2026-03-31 5/250 2026-04-01 15:21 by 159357hjz
[考研] 070300化学354求调剂 +15 101次希望 2026-03-28 15/750 2026-03-31 17:58 by jp9609
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭