24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2128  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)

[求助] 如何去找BL21(DE3)中的单拷贝基因 已有1人参与

我要测定以BL21(DE3)为受体菌中所含的重组质粒拷贝数,根据荧光定量PCR可以进行测定质粒拷贝数,不过需要BL21(DE3)中的单拷贝基因做内参,所以求求各位神虫,不胜感激!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)

能给做一个在NCBI中查找并下载大肠杆菌BL21(DE3)全基因组序列的详细操作步骤吗?谢谢各位神虫

发自小木虫Android客户端
8楼2016-04-19 08:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

noblefire

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-04-10 23:01:24
这个菌株已经全基因组测序了,你做质粒的拷贝数一定用的是DNA作为模板,而不是cDNA,所以可以说除了rRNA gene和极少数的基因之外都是单拷贝的,你从NCBI上面下载BL21(DE3)的基因组随便找个基因就行了。
2楼2016-04-07 08:58:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张鑫1373

银虫 (小有名气)

BL21(DE3)全基因组在NCBI上我也查到了,我担心正好随机选上的基因正好是多拷贝

发自小木虫Android客户端
3楼2016-04-07 11:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noblefire

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 张鑫1373 at 2016-04-07 11:36:56
BL21(DE3)全基因组在NCBI上我也查到了,我担心正好随机选上的基因正好是多拷贝

基本上不可能,如果你有基因组序列了,可以在设计引物完成之后全基因组比对一下引物的特异性,如果特异性都没有问题那么就不可能出现多拷贝。
4楼2016-04-08 07:32:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 xzghyuj 2026-04-04 7/350 2026-04-04 22:25 by oooqiao
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 358求调剂 +5 秋gk 2026-04-04 5/250 2026-04-04 21:03 by dongzh2009
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 求调剂:085600材料与化工,考材科基,总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 一志愿沪985,326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 专硕085601求调剂 +7 suyifei 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:00 by 欣喜777
[考研] 319求调剂 +18 太容易1018 2026-04-01 18/900 2026-04-03 11:18 by linyelide
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +15 秋二十二 2026-03-30 15/750 2026-04-03 10:19 by linyelide
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 326求调剂 +10 崽崽仔 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:08 by 帕尔马拉特
[考研] 295求调剂 +7 愿旅途永远坦然 2026-04-02 7/350 2026-04-03 08:22 by fangshan711
[考研] 085600,320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 321求调剂 一志愿 浙江工业大学生物医药 +5 嘿嘿HC 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:23 by sophie2180
[考研] 【求调剂】新能源材料本科,一志愿211,初试321 +6 求调剂学校, 2026-04-02 6/300 2026-04-02 09:41 by 晴空210210
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
信息提示
请填处理意见