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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 大片段连接问题
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想不通的猴子

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段连接问题 已有3人参与

通过克隆得到一个大约5.5k的片段，可是一直跟载体连不上，载体使用的是PEASY-Blunt，可是最后检测是空载，怎么解决呢？要不要换载体？

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1楼 2016-03-25 09:23:23
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想不通的猴子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wxb2061 at 2016-03-25 17:19:48
我最近在连接一个5000左右的片段到pet24b，总是连不进去

你说的这个载体不清楚呢，哪个公司的呢？目的片段也是平末端？

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18楼2016-03-25 22:54:23
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maixiaodaou

新虫 (小有名气)
你是如何检测的呢？

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2楼2016-03-25 09:33:48
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maixiaodaou

新虫 (小有名气)
你是如何验证是空载的呢

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3楼2016-03-25 09:34:19
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想不通的猴子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by maixiaodaou at 2016-03-25 09:34:19
你是如何验证是空载的呢

蓝白斑板挑菌后提质粒后酶切检测的，载体大约是4k，只有载体条带，没有目的片段的条带

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4楼2016-03-25 09:37:17
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