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-字仲康

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-字仲康

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3楼2016-03-25 08:13:42
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star013

新虫 (知名作家)


2楼2016-03-25 07:15:06
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
-字仲康: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-29 22:09:20
如果感受态和操作都没问题的话:
①不知道楼主是否比较过胶回收后的载体片段和目的片段的浓度;
②另外楼主可以用相同浓度的载体的做下单酶切实验(分别sacI和NdeI),并和双酶切一起跑胶看下结果,看下是不是NdeI的活性不高,我们实验室一般50微升的体系右2.5微升的酶
③saCI 和 Nde双酶切会切去50bp左右的片段,不知道提高楼主的琼脂糖浓度可不可以分辨出
④另外连接效率不高的可以过夜连接,培养液离心浓缩,多挑几个单菌落(多挑几个不会浪费很多时间)
4楼2016-03-29 20:07:55
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rfywoaini

银虫 (初入文坛)

挑单菌落吧,多找几个,7个左右吧

发自小木虫IOS客户端
萧瑟秋风今又是,换了人间。
5楼2016-03-29 21:12:35
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