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-字仲康
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1楼
2016-03-24 20:46:21
已阅
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TA的回帖
jackie在努力
新虫
(初入文坛)
应助: 2
(幼儿园)
金币: 802.3
帖子: 30
在线: 12小时
虫号: 3601515
注册: 2014-12-18
专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
-字仲康: 金币+5,
★★★
很有帮助
2016-03-29 22:09:20
如果感受态和操作都没问题的话:
①不知道楼主是否比较过胶回收后的载体片段和目的片段的浓度;
②另外楼主可以用相同浓度的载体的做下单酶切实验(分别sacI和NdeI),并和双酶切一起跑胶看下结果,看下是不是NdeI的活性不高,我们实验室一般50微升的体系右2.5微升的酶
③saCI 和 Nde双酶切会切去50bp左右的片段,不知道提高楼主的琼脂糖浓度可不可以分辨出
④另外连接效率不高的可以过夜连接,培养液离心浓缩,多挑几个单菌落(多挑几个不会浪费很多时间)
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4楼
2016-03-29 20:07:55
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