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圆加leaf新虫 (小有名气)
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[交流]
逆转录试剂盒和TA克隆试剂盒的区别是什么?
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本人准备在大肠杆菌中转入一段基因,以表达某个蛋白使大肠杆菌能生产新的东西。在重组DNA时遇到困惑,想惊叫各位老师 已知这段基因的mRNA 序列,我看了文章后,是这么理解:扩增——凝胶电泳——回收PCR产物——转化到细菌——提质粒——测序,不知这么理解是不是对。我看到常用到两个试剂盒,一个是逆转录试剂盒,一个是TA克隆试剂盒,我想请问这两个试剂盒的差别是什么?用逆转录试剂盒加引物然后去转录机子扩展转录,得到的不就是扩增的吗,为什么还要再用TA克隆克隆,TA克隆试剂盒里是不是就有载体,有感受态细胞? |
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2楼2016-03-24 16:02:32
圆加leaf
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3楼2016-03-24 16:17:01
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逆转录只是把RNA反转录成cDNA,TA克隆是克隆的一个方法,把你扩增出来的目的片段切胶,回收,连接到载体,转化进入感受态细胞 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-03-24 21:51:35
maixiaodaou
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逆转录试剂盒,就是将mRNA反转录为cDNA,用来作为基因克隆,做PCR的模板。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-25 00:12:13
maixiaodaou
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TA克隆就是一个简单的用来克隆的T载体,可以将你克隆出来的目的片段连接到这个载体上,热激转化到大肠感觉的感受态细胞中,这样可以保菌,保留你的目的基因,也可以用菌液提质粒用于测序 发自小木虫Android客户端 |
6楼2016-03-25 00:14:48
hua_geduo
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10楼2016-04-25 16:49:10












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