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andyshang木虫 (小有名气)
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[求助]
PCR扩增时目的条带很暗~ 已有3人参与
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这几天一直在从酵母基因组上P基因,结果P出来的目的条带很暗。 PCR用的酶是Primerstar，反应体系是50ul,加的模板量是3ul，DNTP 4ul,buffer 10ul,引物各1ul，水30ul,酶0.5ul， 反应程序： 98℃ 5min, 98℃ 15s, 50℃ 30s, 72℃ 1min30s 72℃ 10min  Administrator 2016-03-23 11hr 59min.jpg |
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2楼2016-03-23 17:29:42
3楼2016-03-23 17:38:24
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
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- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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不清楚你的循环数有多少，退火温度有点低，基因组做模板最好做个优化，体系里面模板量可以减少，酶量可以提高些，50微升体系可以分装两管各25微升进行扩增，祝好！ 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-03-23 17:51:13
5楼2016-03-23 18:35:39
glove94
木虫 (小有名气)
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6楼2016-03-27 18:02:09
牛振鹏8888
木虫 (正式写手)
神
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- 性别: GG
- 专业: 药理学
7楼2018-03-27 20:37:16
