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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 关于免疫组化实验中，采取梯度酒精进行切片脱水时，如何防止酒精的挥发问题？
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xiuxingye

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于免疫组化实验中，采取梯度酒精进行切片脱水时，如何防止酒精的挥发问题？ 已有2人参与

请教各位生物方向的大神，小弟在免疫组化实验过程中遇到一个头疼的问题，
      问题描述如下：实验是准备在一个自动化的染色仪上操作，但是在切片的脱水上遇到麻烦，由于是仪器自动用钢针吸取酒精（共3种，浓度为85%、95%、无水）加到切片组织上，所以装酒精的瓶子不能封盖密封，需要敞口，但是酒精的挥发性比较强，而染色流程较长，直接导致酒精的利用率太低。
      之前想过利用十字胶塞来进行密封，但是也有弊端：钢针的特氟龙涂层与胶塞会产生磨损，导致针清洗效果不佳；另外由于胶塞与酒精瓶瓶底有一定距离，会加大针清洗的长度；另外钢针的液面探测功能也不好做；此外，十字胶塞对酒精的密封效果不明。
      小弟是新虫，第一次求助发帖 ，金币不多，先奉上20个！希望有相关方面的经验或了解相关应用的大神，帮忙解一下惑。  拜谢！！！
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1楼 2016-03-23 14:54:55
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kop9831

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
办法也不是没有，如果你能做一个放酒精瓶子的底座，然后瓶口可以用塑料盖，中间打个眼，用孔径比你的钢针略大的管子插下去，直接插到底端，但不要接触瓶底，如图所示
关于免疫组化实验中，采取梯度酒精进行切片脱水时，如何防止酒精的挥发问题？
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2楼2016-03-23 15:22:12
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kop9831

金虫 (小有名气)
最好用透明玻璃瓶，包上锡箔纸，在针尖能达到最低的地方留空，以便观察还剩多少。
在盖子和小管之间最好不要完全密封。
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3楼2016-03-23 15:26:40
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xiuxingye

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kop9831 at 2016-03-23 15:22:12
办法也不是没有，如果你能做一个放酒精瓶子的底座，然后瓶口可以用塑料盖，中间打个眼，用孔径比你的钢针略大的管子插下去，直接插到底端，但不要接触瓶底，如图所示
...

这种方法倒是很妙！
就是这个管子里面的酒精仍然会和空气接触，可能还是有挥发，当然相比较而言，这个产生挥发的液面面积要小多了。可能就直径6mm的液面。
这种防挥发的效果不知道怎样，您是在哪儿见过类似的用法吗。
还有，请教下几个问题，1.您这个瓶子下面加个底座有别的用意吗？》还是只是放置瓶子用的。2.瓶子包上锡箔纸是为了给酒精避光吗？3.盖子和小管之间不做完全密封的好处是什么呢？多谢啊
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4楼2016-03-23 16:02:59
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kop9831

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiuxingye at 2016-03-23 16:02:59
这种方法倒是很妙！
就是这个管子里面的酒精仍然会和空气接触，可能还是有挥发，当然相比较而言，这个产生挥发的液面面积要小多了。可能就直径6mm的液面。
这种防挥发的效果不知道怎样，您是在哪儿见过类似的用法 ...

底座的用意是为了对准你的钢针的，还有就是在进样的时候避免瓶子移动。
无水酒精见光会加速挥发，所以加上锡箔纸。
盖子和小管之间不做完全密封是为了使瓶内和外界气压保持平衡，如果完全封闭有可能导致瓶内负压，会使瓶内气态酒精浓度过大，一旦外界温度比较高，会怎么样你可以想想。

结构比较类似有工业产注射用水的大罐，我也是偶然看到结构图才画这样的。
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xiuxingye
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5楼2016-03-23 16:22:20
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xiuxingye

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by kop9831 at 2016-03-23 16:22:20
底座的用意是为了对准你的钢针的，还有就是在进样的时候避免瓶子移动。
无水酒精见光会加速挥发，所以加上锡箔纸。
盖子和小管之间不做完全密封是为了使瓶内和外界气压保持平衡，如果完全封闭有可能导致瓶内负压 ...

哦 明白了  多谢了
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6楼2016-03-25 09:42:34
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北城风雪

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

用封口膜试试。既可以把口封住，又不影响吸取效果。
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有所为，无所谓
7楼2016-03-27 20:45:36
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lyf1850
祝福    祝福
8楼2016-03-27 21:08:16
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kop9831

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 北城风雪 at 2016-03-27 20:45:36
用封口膜试试。既可以把口封住，又不影响吸取效果。

不用封口膜的原因就在于会在膜表面形成白色物质，然后变硬出现孔洞，除非隔两天换一次这样才行。
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9楼2016-03-28 08:56:53
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xiuxingye

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 北城风雪 at 2016-03-27 20:45:36
用封口膜试试。既可以把口封住，又不影响吸取效果。

封口膜是指的是瓶口做封口膜还是瓶内页面做封口膜？主要是酒精在仪器上，每天都要做多个项目检测，每天会被钢针多次(60次左右)吸样…封口膜能适用么？

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10楼2016-03-28 12:08:28
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