24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 395  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)

[求助] 重叠PCR 已有2人参与

求问,现在将2个3000bp左右的片段利用重叠PCR的方法连接在一块,因为怕连接不成功,中间重叠的片段就设计了大约200bp,我查看一般的重叠PCR大约都在20bp左右,想问一下,200bp重叠的片段进行重叠PCR靠谱吗,该怎样设置退获得温度?求大神指导下。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangbest007

木虫 (正式写手)

用软件分析看看,退火,变性温度

发自小木虫Android客户端
学无止境
3楼2016-03-21 12:33:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这200bp的引物设计起来,也是够不容易的吧,一般不需要这么长的

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-03-21 12:11:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hua_geduo

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看看Tm值,200bp估计会挺高的了,两步法吧,72度变性和延伸合为一步
4楼2016-03-24 16:47:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-04 11/550 2026-04-04 23:58 by 永字号
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 材料与化工371求调剂 +3 陪琳看海 2026-04-04 3/150 2026-04-04 23:39 by JourneyLucky
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 考研调剂 +6 15615482637 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:43 by yu221
[考研] 358求调剂 +5 秋gk 2026-04-04 5/250 2026-04-04 21:03 by dongzh2009
[考研] 0703求调剂383分 +8 W55j 2026-04-03 8/400 2026-04-04 20:09 by xhai2011
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊!
[考研] 考研调剂 +4 zybz冲冲冲 2026-04-03 6/300 2026-04-04 13:08 by zybz冲冲冲
[考研] 求生物学专业调剂-332分 +5 云朵遛弯指南 2026-04-04 5/250 2026-04-04 10:05 by rzh123456
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 8/400 2026-04-04 07:52 by 1753564080
[考研] 298求调剂 +9 种圣赐 2026-03-29 9/450 2026-04-03 17:52 by Jimmyandyou
[考研] 312求调剂 +6 小小墨123 2026-04-02 7/350 2026-04-03 07:32 by jsw79
[考研] 264分,求任意工科调剂 +4 zzlqwq 2026-03-29 5/250 2026-04-02 17:17 by 何曾几何
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 14:08 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 0710生物学,325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[有机交流] 甲基亚磺磺酸钠和甲基磺酸酯反应机理 10+3 kaobao456 2026-03-29 4/200 2026-03-30 23:16 by nBu锂
信息提示
请填处理意见