关于质粒构建的疑难问题，求指点！！！！ - 分子生物 - PCR相关

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木虫 (正式写手)

引用回帖:

10楼: Originally posted by 海忆梦奇 at 2016-04-27 10:58:36
你好！想问一下，引物加酶切位点和保护碱基是如何选择的？苦恼好久了，求助大神！...

NEB有个手册，加入哪几个保护碱基后，酶切效率90%以上，
至于酶切位点的选择，首先是序列内部不能有，其次选常用的。
比如 BamH1 EcoR1 Pst1 Xho1. 又便宜又好用。

此座可言轻社稷，江山万里起风尘。

11楼2016-04-27 17:30:02

新虫 (初入文坛)

建议你选择酶切之前用DNAMAN这个软件检测一下你的序列里有哪些酶切位点，是不是有已经包括了你要用来做酶切的酶。而且那个软件可以告诉你哪个位置有什么酶切位点，比如1352时有a酶切位点。。

发自小木虫Android客户端

12楼2016-05-15 00:04:29

铁杆木虫 (著名写手)

同样遇到了这样的问题！也是2000bp的基因，缺失了中间1500bp呢！您的问题后来解决了吗？

13楼2017-02-28 09:43:42

新虫 (小有名气)

目的基因里应该检查一下有没有酶切位点

发自小木虫Android客户端

14楼2017-12-07 14:51:33

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