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HPLC的C18柱压力很诡异，求大神帮忙分析分析！搞不懂啊~~~已有4人参与
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首先流动相应该没问题，A相是超纯水，B相也用0.45um的过滤器过滤，样品也过滤了。 诡异的事发生了，目前为止换了两根C18色谱柱。两个柱子第一次使用压力都是挺高的（纯乙腈1ml/min，500多psi），之前的柱子走乙腈最低是200多psi。就是这里搞不懂！ ？？？ 说说上一根柱子的情况：上一根的柱子结局有点惨，完全堵死，完全堵死。样品简直坑，0.45um过滤了，放置一段时间后。全析出，然后用什么也溶解不了，导致柱子堵死，反冲也是完全堵死（可能这时候系统还有些不溶的 颗粒物，没有冲洗，直接反冲，然后又堵死了这端）。就是走0.2ml/min的乙腈也飙到4000+，两端都是，所以应该是完全堵死。才用了几个月，伤心死。。。 这次的新柱子，已经用异丙醇冲洗过夜了，压力还是挺高。特别走高浓度水相，飙到3000psi。 问题1：是不是换柱子之前，要先用溶剂冲洗一下系统，再换新柱？不然系统的东西可能会堵塞柱子吗？ 问题2：这根柱子的情况是不是受上一根柱子的影响，有东西堵了这次新柱子，压力才会那么高。  201522142451.jpg |
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