| 查看: 3270 | 回复: 19 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
HPLC的C18柱压力很诡异，求大神帮忙分析分析！搞不懂啊~~~ 已有4人参与
|
||
|
首先流动相应该没问题，A相是超纯水，B相也用0.45um的过滤器过滤，样品也过滤了。 诡异的事发生了，目前为止换了两根C18色谱柱。两个柱子第一次使用压力都是挺高的（纯乙腈1ml/min，500多psi），之前的柱子走乙腈最低是200多psi。就是这里搞不懂！ ？？？ 说说上一根柱子的情况：上一根的柱子结局有点惨，完全堵死，完全堵死。样品简直坑，0.45um过滤了，放置一段时间后。全析出，然后用什么也溶解不了，导致柱子堵死，反冲也是完全堵死（可能这时候系统还有些不溶的 颗粒物，没有冲洗，直接反冲，然后又堵死了这端）。就是走0.2ml/min的乙腈也飙到4000+，两端都是，所以应该是完全堵死。才用了几个月，伤心死。。。 这次的新柱子，已经用异丙醇冲洗过夜了，压力还是挺高。特别走高浓度水相，飙到3000psi。 问题1：是不是换柱子之前，要先用溶剂冲洗一下系统，再换新柱？不然系统的东西可能会堵塞柱子吗？ 问题2：这根柱子的情况是不是受上一根柱子的影响，有东西堵了这次新柱子，压力才会那么高。  201522142451.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
271求调剂
已经有31人回复
-
291求调剂
已经有4人回复
-
山东省基金2026
已经有11人回复
-
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有10人回复
-
材料工程281还有调剂机会吗
已经有43人回复
-
291求调剂
已经有5人回复
-
085801电气专硕272求调剂
已经有18人回复
-
296求调剂
已经有11人回复
-
求调剂学校
已经有14人回复
-
药学求调剂
已经有9人回复
11楼2016-03-18 15:44:48
2楼2016-03-18 11:48:39
zongyuan
捐助贵宾 (知名作家)
- 应助: 304 (大学生)
- 金币: 4637.7
- 散金: 2225
- 红花: 61
- 帖子: 8282
- 在线: 823小时
- 虫号: 766948
- 注册: 2009-05-10
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cgjjme43: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-03-18 12:21:13
感谢参与，应助指数 +1
cgjjme43: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-03-18 12:21:13
|
根据本人经验，有如下可能： 1.溶解样品是否正确，包括澄清度，是否过滤，高有机相进入，但起始比例有机相很小，样品析出 2.室内温度是否过低，盐溶液析出，特别是过夜空调关掉的企业，着实可恨 3.盐溶液和有机相混合的最高比例是否超过70%，特别是盐浓度非常大，这时尽量不要用仪器混合，可以两相都用有机盐溶液系统，用之前过滤盐溶液，再混合超声 4.仪器问题，冲洗时间是否足够，有人用10min低比例有机水节省时间，我只能呵呵了 5.YMC的柱子压力就容易升高 6.请一一比对 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
cgjjme433楼2016-03-18 11:57:57
4楼2016-03-18 12:12:05
