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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

[求助] 摇瓶发酵大肠杆菌基因工程菌表达蛋白 已有2人参与

摇瓶LB发酵大肠杆菌基因工程菌表达蛋白,IPTG诱导几个小时后发酵液变澄清,什么原因,噬菌体吗,测pH和正常时无差别,无其他现象,有遇到过这种问题的吗,如何解决,请各位大神指教
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HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by -字仲康 at 2016-03-19 09:58:42
加抗性就是防止质粒丢失,前期你加了抗生素,筛选效果就没那么好了,因为接下来的上罐发酵是不加抗生素的(加了抗生素,你要在后续的检测里增加一条,检测抗生素的残留,还有把抗生素给去除了)。如果你的菌在补加 ...

1.加抗性就是防止质粒丢失,前期你加了抗生素,筛选效果就没那么好了,  您指的是不如不加抗生素的筛选效果好?为什么?
2.我接触到的上罐发酵都是加抗生素的啊,“加了抗生素,你要在后续的检测里增加一条,检测抗生素的残留,还有把抗生素给去除了”,请问为什么?
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
10楼2016-03-24 15:59:31
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乐事猫

新虫 (小有名气)

2楼2016-03-16 16:55:56
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种现象已经有好多帖子在说了,噬菌体污染的可能性很大,建议更换克隆进行重新诱导。然后转接时试管和摇瓶都不要加抗性,溶菌的瓶子及菌液不要随意倾倒。

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-03-16 18:39:32
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hanwei1150

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-03-16 18:39:32
这种现象已经有好多帖子在说了,噬菌体污染的可能性很大,建议更换克隆进行重新诱导。然后转接时试管和摇瓶都不要加抗性,溶菌的瓶子及菌液不要随意倾倒。

为什么转接时试管和摇瓶都不要加抗性,
更换克隆进行重新诱导,有哪些需要注意的细节
HighdensityfermentationofrecombinantE.coli
4楼2016-03-17 09:33:49
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