24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2530  |  回复: 33

kingjazz23

金虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by Bioexperixgs at 2016-03-13 13:03:21
pam与临近基序之间插入突变序列,一般是加一个终止密码子并使pam突变以及一个酶切位点,两个作用:使pam突变不再被cas识别;终止密码子是插入靶基因使靶基因提前表达终止;酶切位点是用于筛选的。突变是复制在修复模 ...

谢谢您的回复!不过还是有些地方不明白,首先你说的插入突变序列是指同源重组后插入的片段吗?然后突变PAM序列应该就是为了不让CAS9蛋白识别,再次发生切割。还有就是将那个终止密码子插入到靶基因中使它提前表达终止是为了什么?
21楼2016-03-13 21:51:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by kingjazz23 at 2016-03-13 21:51:58
谢谢您的回复!不过还是有些地方不明白,首先你说的插入突变序列是指同源重组后插入的片段吗?然后突变PAM序列应该就是为了不让CAS9蛋白识别,再次发生切割。还有就是将那个终止密码子插入到靶基因中使它提前表达终 ...

提前表达终止,这个基因就不能表达成完整蛋白,也就失去了作用。

发自小木虫Android客户端
22楼2016-03-13 23:26:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by kingjazz23 at 2016-03-13 21:51:58
谢谢您的回复!不过还是有些地方不明白,首先你说的插入突变序列是指同源重组后插入的片段吗?然后突变PAM序列应该就是为了不让CAS9蛋白识别,再次发生切割。还有就是将那个终止密码子插入到靶基因中使它提前表达终 ...

我觉得你可以看论文中的示意图,就能很容易理解了。

发自小木虫Android客户端
23楼2016-03-13 23:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by kingjazz23 at 2016-03-13 21:51:58
谢谢您的回复!不过还是有些地方不明白,首先你说的插入突变序列是指同源重组后插入的片段吗?然后突变PAM序列应该就是为了不让CAS9蛋白识别,再次发生切割。还有就是将那个终止密码子插入到靶基因中使它提前表达终 ...

2015年有一篇白念CRISPR/cas9构建的论文,你可以看看。思路很不错的。

发自小木虫Android客户端
24楼2016-03-13 23:30:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jena_fungus

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
24楼: Originally posted by Bioexperixgs at 2016-03-13 23:30:49
2015年有一篇白念CRISPR/cas9构建的论文,你可以看看。思路很不错的。
...

请问一下这篇文章题目是?
25楼2016-03-14 12:35:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

引用回帖:
25楼: Originally posted by Jena_fungus at 2016-03-14 12:35:40
请问一下这篇文章题目是?...

A Candida albicans CRISPR system permits genetic engineering of essential genes and gene families
26楼2016-03-14 13:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bioexperixgs

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
25楼: Originally posted by Jena_fungus at 2016-03-14 12:35:40
请问一下这篇文章题目是?...

A Candida albicans CRISPR system permits genetic engineering of essential genes and gene families
27楼2016-03-14 13:51:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AliTheFox

金虫 (小有名气)

我想知道这个PAM中文是什么鬼?

发自小木虫Android客户端
28楼2016-03-14 15:18:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kingjazz23

金虫 (小有名气)

引用回帖:
28楼: Originally posted by AliTheFox at 2016-03-14 15:18:48
我想知道这个PAM中文是什么鬼?

有很多不同的中文翻译,大概意思就是原间隔序列旁边的基序,我一般是念原间隔序列旁基序
29楼2016-03-14 17:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jena_fungus

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
27楼: Originally posted by Bioexperixgs at 2016-03-14 13:51:35
A Candida albicans CRISPR system permits genetic engineering of essential genes and gene families...

谢谢
30楼2016-03-14 19:40:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kingjazz23 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 6/300 2026-05-23 13:28 by Peterchao
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[考博] 26/27申博自荐 10+3 ZXW0202 2026-05-22 5/250 2026-05-23 09:40 by shen1253
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +3 zju2000 2026-05-21 4/200 2026-05-23 08:33 by xli1984
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +27 国自然国社科中 2026-05-17 28/1400 2026-05-22 16:25 by hunter无悔
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见