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ackee

新虫 (小有名气)

[求助] 过镍柱的几个问题? 已有1人参与

1,请问用重力法过镍柱的时候,蛋白裂解上清液一般和镍柱混匀多长时间呢?
2,请问用重力法过镍柱的时候,冲柱子的时候一个梯度一般要冲多少个柱体积呢?
3,用AKTA过镍柱的时候,要配什么溶剂呢?
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北国佳人

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好,估计你是刚开始做该方向的工作,
混合多长时间,你可参照你购买的镍粒说明书,有的质量好,结合好,效率高,,,这个有个大致的范围的,不会很精确
冲柱子,严谨的方法是检测收集的液体,根据相应指标判断是否量足够,一般来说,冲得体积越多,除杂质或者洗脱目标成分会充分些(看具体操作),不足之处出收集的液体量增多,后续浓缩麻烦些
如果用AKTA,可参照他的工作手册,可节省一些摸索时间
努力的小蜜蜂
3楼2016-03-11 15:27:45
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ackee

新虫 (小有名气)

还有,裂解液与镍柱混合时裂解上清液也需要用0,45um的滤头过滤吗?如果是大蛋白会不会给滤出去?
2楼2016-03-11 11:45:29
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ackee

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 北国佳人 at 2016-03-11 15:27:45
你好,估计你是刚开始做该方向的工作,
混合多长时间,你可参照你购买的镍粒说明书,有的质量好,结合好,效率高,,,这个有个大致的范围的,不会很精确
冲柱子,严谨的方法是检测收集的液体,根据相应指标判断是 ...

谢谢啦

发自小木虫Android客户端
4楼2016-03-14 16:49:27
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