24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4010  |  回复: 20
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小胖芙芙

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助!!短片段(169 bp)PCR扩增,用Takara La Taq酶,不出条带呀。。。。 已有5人参与

小白第一次发帖,各位大神见谅。。。。
以前用普通的2×Taq PCR Mix扩增,它含的酶是Taq DNA Polymerase,扩增条带是169 bp,当时可以出条带,亮度可以。也送测了的,返回结果有的位点是双峰。
因为提的DNA是混合物,现在想做克隆看看混合物的成分,就换成了Takara的La taq,但是不出条带了呀。。。引物没变,PCR条件也没变。。。。
我的条件是这样的:
(1)94℃ 5min
(2)94℃ 30s
(3)51 ℃ 30s
(4)72℃ 45s
(5)(2)-(4)39
(6)72℃ 10min
(7)4℃ forever
求各位大神帮帮忙,看看有没有啥问题啊。。。。
有啥没说到的,各位大神尽管问。。。。。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小胖芙芙

新虫 (初入文坛)

各位大神们,我做出来啦,换了个酶,调了个程序,出来了呀。。

发自小木虫Android客户端
18楼2016-03-06 16:21:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

dragonhmw

铁杆木虫 (正式写手)

不应该啊,溶液体系是什么?

发自小木虫Android客户端
2楼2016-03-06 07:24:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fudan671

木虫 (著名写手)

重新摸索条件,怀疑da降解

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-03-06 07:43:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilberg

新虫 (小有名气)

4楼2016-03-06 08:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂(080500) +14 A child 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:06 by 探123
[论文投稿] arxiv背书人邮件求助 20+3 redcom 2026-03-25 7/350 2026-03-30 10:56 by bobvan
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +14 jhybd 2026-03-23 19/950 2026-03-30 10:34 by vgtyfty
[考研] 309求调剂 +10 谁不是少年 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:06 by limeifeng
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见