24小时热门版块排行榜    

查看: 2400  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小鼹鼠

木虫 (小有名气)

[求助] 可不可以把两个质粒导入同一个菌株? 已有1人参与

之前做过把两个不同的质粒同时转化,现在想把同一个质粒,比如pet28,但是连了两个不同的片段的两个质粒,同时转化。感觉应该也是可以的,但是具体能不能表达,或者对彼此有没有影响,也不清楚。可以这样吗?
回复此楼
天道酬勤
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


28和32不行同时共存,复制起点相互干扰

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-04 19:19:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

原海亮

木虫 (著名写手)

这个首先两个质粒用的相同载体本身筛选克隆就比较麻烦,我们之前都是一个用28卡那抗,和另一种抗的,比如32氨苄抗的,对于会不会影响表达,和你的蛋白是有关系的,建议选择不同抗的载体进行同宿主表达,比较大肠表达构建周期还是比较短的,可以试试!

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-03-04 19:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

noblefire

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看看质粒的复制子,pET28a和pET32a都是f1复制子就不行。当然如果抗性不一样也是可以共存的但是很不稳定,互相影响。比如pET28a和pUC19就可以共存,后者是pBR322复制子。
如果要表达两个基因可以连接到pETDuet这种有两个多克隆位点的质粒
4楼2016-03-05 16:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
请填处理意见