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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC 梯度设置问题
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sxdxsrf

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC 梯度设置问题 已有3人参与

请教大家，做HPLC我要的峰在12min就出峰，此时流动相是15%的乙腈，12min之后的峰没什么用但会对下一针有影响，所以想问一下，12min后的流动相可以直接换成纯乙腈或逐步过渡到纯乙腈吗？然后等所有峰出完后再换成15%乙腈，这样行吗？
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1楼 2016-03-02 08:56:55
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xiedaifa

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以，你是做含量吗？
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凡是靠自己。
4楼2016-03-02 09:55:29
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ray2317

木虫 (小有名气)

知足者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxdxsrf: 金币+5 2016-03-02 09:53:00
“12min后的峰没什么用”这是什么意思？是梯度峰？还是说你用梯度测含量？
纯乙腈没有必要，后面的梯度大一点，逐步到高比例乙腈就可以了，最后要回到你的初始比例，走几分钟，不然可能会影响下一针。
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sxdxsrf
药物研发
2楼2016-03-02 09:08:04
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sxdxsrf

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ray2317 at 2016-03-02 09:08:04
“12min后的峰没什么用”这是什么意思？是梯度峰？还是说你用梯度测含量？
纯乙腈没有必要，后面的梯度大一点，逐步到高比例乙腈就可以了，最后要回到你的初始比例，走几分钟，不然可能会影响下一针。

我只测12min峰的含量，以后出的峰都不测定，所以说没什么用。12min之前的流动相一直是15%乙腈，就想问之后的流动相比例怎么设置能尽快走完这一针
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3楼2016-03-02 09:52:27
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxdxsrf: 金币+5 2016-03-02 14:01:12
你的思路完全是对的，就这么设置
A-ACN  B-H2O
时间（min）：     0       15      16     26    27      37
      A%            15       15      90     90    15     15
      B%            85       85      10     10     85     85
需要的峰出来以后，后面一般用90%乙腈冲十分钟把不需要的组分冲洗出来，后面在用十分钟来平衡色谱柱，就可以再进下一针了
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5楼2016-03-02 11:24:09
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