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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC问题请教
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cgjjme43

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC问题请教 已有1人参与

Waters 的仪器，A相是醋酸铵，PH=10。B相是乙腈，梯度洗脱。
设置洗脱条件如下，流量设置为1ml/min，0-50min，乙腈含量由0上升至100%；再走10min，共60min。
那么问题来了。
  （1）我是先设置A为1ml/min冲10min，再设置B为1ml/min冲10min，Sample Text，再平衡25min后进样。请问这样设置有没有问题？

结果出来是可以的，就是这样会不会让柱子坏的快。
（2）这个pH相对来讲是不是高了，好像一般是8的，太高会导致柱床塌陷？
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不要在拼搏的年龄选择了安逸
1楼 2015-12-30 18:24:48
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)
100%的乙腈，确定不会使醋酸胺析出，感觉楼主两个100%？，梯度不好。

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5楼2015-12-30 21:21:02
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cgjjme43

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wjg6670 at 2015-12-30 21:21:02
100%的乙腈，确定不会使醋酸胺析出，感觉楼主两个100%？，梯度不好。

好像是会析出的，因为导出的废液管就看到明显的析出现象。求大神支招

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不要在拼搏的年龄选择了安逸
6楼2015-12-30 21:33:30
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sunhaijian

金虫 (小有名气)
如果主峰能洗脱出来，两边的100%最好调一下。能延长柱子寿命

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人生，在路上
7楼2015-12-30 22:10:47
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变幻tt

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cgjjme43: 金币+2 2016-01-04 16:13:07
首先你的色谱柱是耐纯水系统的吗？其次，流动相不能从缓冲盐直接变化到有机溶剂，这样盐是会析出的，即磨损设备、堵管路也堵色谱柱。你的梯度设的也不合适，不知道你乙酸铵浓度是多少，有机项最高比例建议控制在80%以下，进样结束后要替换成水项把系统中的缓冲盐冲出来。
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9楼2016-01-01 16:42:16
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笑傲江湖中人

新虫 (小有名气)
ph太高了，一般2-8，为了保护柱子，7.5以上的最好不要进柱子了

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3楼2015-12-30 19:42:00
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普通回帖

cgjjme43

金虫 (正式写手)
无语死了，那个sample text的内容是“作用是冲走杂质”
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不要在拼搏的年龄选择了安逸
2楼2015-12-30 18:25:43
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cgjjme43

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 笑傲江湖中人 at 2015-12-30 19:42:00
ph太高了，一般2-8，为了保护柱子，7.5以上的最好不要进柱子了

我知道，所以我们每使用一次，保留时间就会提前一点，最后就不能使用了。
    那还有其他问题呢？请问

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不要在拼搏的年龄选择了安逸
4楼2015-12-30 21:13:03
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爱吃狼的羊

金虫 (小有名气)
你可以走基线啊

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8楼2015-12-31 15:28:40
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cgjjme43

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunhaijian at 2015-12-30 22:10:47
如果主峰能洗脱出来，两边的100%最好调一下。能延长柱子寿命

谢谢
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不要在拼搏的年龄选择了安逸
10楼2016-01-04 16:13:17
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