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cgjjme43

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC问题请教 已有1人参与

Waters 的仪器,A相是醋酸铵,PH=10。B相是乙腈,梯度洗脱。
设置洗脱条件如下,流量设置为1ml/min,0-50min,乙腈含量由0上升至100%;再走10min,共60min。
那么问题来了
  (1)我是先设置A为1ml/min冲10min,再设置B为1ml/min冲10min,Sample Text,再平衡25min后进样。请问这样设置有没有问题?

结果出来是可以的,就是这样会不会让柱子坏的快。
(2)这个pH相对来讲是不是高了,好像一般是8的,太高会导致柱床塌陷?
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

100%的乙腈,确定不会使醋酸胺析出,感觉楼主两个100%?,梯度不好。

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5楼2015-12-30 21:21:02
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cgjjme43

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wjg6670 at 2015-12-30 21:21:02
100%的乙腈,确定不会使醋酸胺析出,感觉楼主两个100%?,梯度不好。

好像是会析出的,因为导出的废液管就看到明显的析出现象。求大神支招

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6楼2015-12-30 21:33:30
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sunhaijian

金虫 (小有名气)

如果主峰能洗脱出来,两边的100%最好调一下。能延长柱子寿命

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人生,在路上
7楼2015-12-30 22:10:47
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变幻tt

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cgjjme43: 金币+2 2016-01-04 16:13:07
首先你的色谱柱是耐纯水系统的吗?其次,流动相不能从缓冲盐直接变化到有机溶剂,这样盐是会析出的,即磨损设备、堵管路也堵色谱柱。你的梯度设的也不合适,不知道你乙酸铵浓度是多少,有机项最高比例建议控制在80%以下,进样结束后要替换成水项把系统中的缓冲盐冲出来。
9楼2016-01-01 16:42:16
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笑傲江湖中人

新虫 (小有名气)

ph太高了,一般2-8,为了保护柱子,7.5以上的最好不要进柱子了

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3楼2015-12-30 19:42:00
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普通回帖

cgjjme43

金虫 (正式写手)

无语死了,那个sample text的内容是“作用是冲走杂质”
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2楼2015-12-30 18:25:43
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cgjjme43

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 笑傲江湖中人 at 2015-12-30 19:42:00
ph太高了,一般2-8,为了保护柱子,7.5以上的最好不要进柱子了

我知道,所以我们每使用一次,保留时间就会提前一点,最后就不能使用了。
    那还有其他问题呢?请问

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4楼2015-12-30 21:13:03
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爱吃狼的羊

金虫 (小有名气)

8楼2015-12-31 15:28:40
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cgjjme43

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by sunhaijian at 2015-12-30 22:10:47
如果主峰能洗脱出来,两边的100%最好调一下。能延长柱子寿命

谢谢
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10楼2016-01-04 16:13:17
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