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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » G+细菌提取基因组，拖带，260/280一直在2.00。求指教
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水石孤人

新虫 (初入文坛)

[求助] G+细菌提取基因组，拖带，260/280一直在2.00。求指教

原来发帖要金币，我还去领了两个才够发个帖子。而且不知道怎么给，同时也请指导！

1.破壁：液氮研磨，溶菌酶处理过夜都用过。+600μL裂解液。
2.+20μLRNase(10毫克每毫升)，37℃，30min。
3.140μL 5M Nacl，4℃，5min。
4.12000rpm,4℃，10min。
5.+等体积苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），充分混匀，静置5min。
6.12000rpm,4℃，10min。
    重复5、6直至抽提界面无沉淀。
7.+等体积氯仿，12000rpm,4℃，10min。
8.+2倍体积无水乙醇，-20摄氏度，过夜。
9.12000rpm,4℃，10min。吸干残留液体。
10.75%乙醇洗涤两次，吸干残留液体。
11.吹干。
12.TE缓冲液溶解。
13.0.8%凝胶电泳，80V。

1号泳道 ：Marker 2K plus。6号泳道：Marker HindⅢ

问题：①一直有拖带。
           ②260/280一直都在2.0左右，胶图下面RNA部分很亮。

G+细菌提取基因组，拖带，260/280一直在2.00。求指教
20160225.png
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1楼 2016-02-26 21:45:17
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铜豌豆壮壮

铁虫 (初入文坛)
有rna

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-02-27 00:50:49
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fudan671

木虫 (著名写手)
加入rna酶

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3楼2016-02-27 07:32:19
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水石孤人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fudan671 at 2016-02-27 07:32:19
加入rna酶

我在第二步加了
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4楼2016-02-27 08:41:19
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