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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by prthefu at 2016-03-01 08:19:34
做连接时需要高浓度的产物,但是,怎样获得高浓度呢?我昨晚胶回收后,再次跑胶检测时,发现纯度可以,但是不是特别亮,这就代表浓度不是很高吗?亮度和浓度是对应的吗?...

亮度和浓度是有一定的参考价值的(相同上样量),获得高浓度的目的条带进行连接,不一定就可以获得较高正确率的转化子,连接的关键在于片段的酶切处理是否完全,如果酶切没有问题,片段浓度较低的话,可以适当调整连接体系,比如20微升,目的是可以多加入一些低浓度的片段,这样基本上可以满足普通克隆转化的(建库转化建议尽量获得高质量片段),,

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
21楼2016-03-01 11:53:15
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fudan671

木虫 (著名写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by prthefu at 2016-03-01 08:15:44
1%的中marker没有跑开,如果增加时间,对目的条带会有影响吗?...

不会

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22楼2016-03-01 16:14:30
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prthefu

木虫 (著名写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by fudan671 at 2016-03-01 16:14:30
不会
...

好的,谢谢
nothing is impossible in this world,if you have the will to win,you can achieve anything
23楼2016-03-01 20:07:43
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jackyoung

新虫 (正式写手)

回收不行可以通过加0.7x胶体积的异丙醇来提高效率

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CestLaVie
24楼2016-03-02 08:24:45
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