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yufei6915

木虫 (著名写手)

[求助] 求助 摩尔吸光系数 已有3人参与

各位战友,请教大家关于分析化学的问题。我的实验是测试蛋白的脂肪酶活性,方法是用酶标仪读取OD405nm值,之后再换算成酶活力单位。我的问题是,因为摩尔消光系数是在浓度1mol//L 光程1cm的条件时测得的,而我实验的底物浓度是0.5mmol/L不是1mol/L,反应用的不是比色皿,光程不是1cm,那我如何用摩尔消光系数 计算酶活力呢?谢谢!
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goodluckformyself~~
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
变换一下啊
A = εcl
ε = A/cl
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2楼2014-06-26 03:10:50
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yufei6915

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaofei_lu at 2014-06-26 03:10:50
变换一下啊
A = εcl
ε = A/cl

如果我的ε是16000,那当c=0.5mmol/L l=0.3125cm时,A=2.5;这个意思是当我c=0.5mmol/L l=0.3125cm时,吸光系数是2.5的意思吗?可以在后面的计算中直接带入2.5作为吸光系数计算吗? 谢谢回复!
goodluckformyself~~
3楼2014-06-26 08:26:22
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 08:26:22
如果我的ε是16000,那当c=0.5mmol/L l=0.3125cm时,A=2.5;这个意思是当我c=0.5mmol/L l=0.3125cm时,吸光系数是2.5的意思吗?可以在后面的计算中直接带入2.5作为吸光系数计算吗? 谢谢回复!...

A是吸光度,不是吸光系数,你测出来的应该是吸光度吧。
ε是摩尔吸光系数。
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4楼2014-06-26 10:46:58
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yufei6915

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaofei_lu at 2014-06-26 10:46:58
A是吸光度,不是吸光系数,你测出来的应该是吸光度吧。
ε是摩尔吸光系数。...

恩,我懂你这个意思。我现在的问题就是我的实验条件不是在标准的条件下进行的,是底物浓度是0.5mmol/L,光程0.3125cm,那我计算酶活力的时候如何用摩尔吸光系数计算呢?? 酶活力的计算公式是:
U=A*V/ t*ε
goodluckformyself~~
5楼2014-06-26 10:59:56
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 10:59:56
恩,我懂你这个意思。我现在的问题就是我的实验条件不是在标准的条件下进行的,是底物浓度是0.5mmol/L,光程0.3125cm,那我计算酶活力的时候如何用摩尔吸光系数计算呢?? 酶活力的计算公式是:
U=A*V/ t*ε...

你测出来的是吸光度吧,用吸光度计算ε = A/cl,c 是浓度,l 是光程
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6楼2014-06-26 11:11:20
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xiaofei_lu

木虫 (小有名气)


crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2014-06-30 19:06:34
引用回帖:
5楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 10:59:56
恩,我懂你这个意思。我现在的问题就是我的实验条件不是在标准的条件下进行的,是底物浓度是0.5mmol/L,光程0.3125cm,那我计算酶活力的时候如何用摩尔吸光系数计算呢?? 酶活力的计算公式是:
U=A*V/ t*ε...

你直接测的可能不是摩尔消光系数,摩尔消光系数只能计算出来。如果你的仪器可以在标准条件下直接给出摩尔消光系数,那 ε = A/(1M*1cm),这个值是错误的,那你就要先用这个错误的值计算出A,然后再用 ε = A/(0.5*10^-3mM*0.3125cm) 计算出正确的摩尔消光系数。
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7楼2014-06-26 11:19:35
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jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
同一物质,条件确定,摩尔吸收系数是定值,是个常数,你只需要带入楼上公式换算就可以了
8楼2014-06-26 15:40:30
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yufei6915

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by jjf139 at 2014-06-26 15:40:30
同一物质,条件确定,摩尔吸收系数是定值,是个常数,你只需要带入楼上公式换算就可以了

您说的换算是指?
goodluckformyself~~
9楼2014-06-26 17:01:57
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XiaOliAngeR

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by yufei6915 at 2014-06-26 17:01:57
您说的换算是指?...

U=2.5*V/t*16000
10楼2014-06-29 14:41:57
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