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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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guduyiyu

金虫 (正式写手)

[求助] loading buffer 有好几种浓度的(5X,6X,10X),做蛋白质,核酸电泳时,该怎么选择呢

loading buffer 有好几种浓度的(5X,6X,10X),做蛋白质,核酸电泳时,该怎么选择呢,谢谢啊
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guduyiyu(silicare代发): 金币+2, 2013-08-01 10:58:20
silicare: BioEPI+1 2013-08-01 10:58:30
没实质区别,总之工作浓度是1X 就对了。需要注意的是,由于点样孔容量有限,所以如果你样品浓度过高可以用低倍数,样品浓度低就用高倍数,以便load 更多的样品!
互助互励,共奋共进!!
5楼2013-08-01 08:56:31
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普通回帖

秋水素心

银虫 (小有名气)

做蛋白时上样浓度为1
认真过好每一天!
2楼2013-07-31 19:38:47
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她城无岁月

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做蛋白的时候得把Loading  buffer稀释成1成.
3楼2013-07-31 22:39:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不管是几X的buffer,在上样时的终浓度是1X。
4楼2013-07-31 23:18:53
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ytflark

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有6xLOADING BUFFER 和10x的loading buffer ,看你手里有哪种。所谓的6x,是指其浓度浓缩了六倍,你稀释6倍后使用。所谓的稀释就是你的样品:loading buffer的体积比为5:1.举个例子,取样品10ul,加2ul的loading buffer混匀后就可以点样了
常用的有6X的,10X的,意思是当你加样品1ul,6Xloading buffer加六分之一ul,要用10X的加十分之一ul混匀就行了,每次点样量视情况而定,一般5微升左右都可,这没啥严格要求的
11
6楼2013-08-01 17:23:55
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guduyiyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-01 08:56:31
没实质区别,总之工作浓度是1X 就对了。需要注意的是,由于点样孔容量有限,所以如果你样品浓度过高可以用低倍数,样品浓度低就用高倍数,以便load 更多的样品!

工作浓度?你是指的buffer:样品的比例中buffer占一份吗,还是别的什么,麻烦说清楚啊
不努力永远不知道自己有多优秀
7楼2013-08-02 13:47:00
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Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by guduyiyu at 2013-08-02 13:47:00
工作浓度?你是指的buffer:样品的比例中buffer占一份吗,还是别的什么,麻烦说清楚啊...

不仅仅是loading buffer,在配置试剂的时候都习惯于陪母液也就是stock。所谓的工作浓度也就是最终使用浓度,一般都是1X,默认的也是1X,但偶尔也会遇到0.5X 。
eg:你要用0.1 M的 NaCL,配置1M的溶液,就称为 10 X。使用的时候稀释10倍就好了。
互助互励,共奋共进!!
8楼2013-08-02 23:00:12
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