关于10×ReactionBuffer:因为要扩增一个完整的质粒，长度要比一般的PCR扩增要长，这要求反应缓冲液要适应长片段扩增，pH要高于普通PCR所用Buffer。关于高保真DNA聚合酶：Pfu的保真度足够，...

连接连个片段，长度分别为50几，由于片段比较少，没有进行第一步两个片段的扩增，直接加入了4个oligo进行PCR，然后第二轮加入两端引物进行扩增。跑胶目的条带很弱，而且拖尾很严重，是什么...

我利用overlappingPCR扩增6.4kb的一个片段，设计了四段引物，每一段扩增都是正确的，两段连起来也是正常的，但四段都连接起来的时候就少800多bp,到底是什么原因啊？大神们帮我这个菜鸟解决...

byreal-timePCR.TheresultsofthisstudyshowedoverlappingandspecificproteomicresponsestoSCMVinfectionbetweenresistantandsusceptiblemaizeecotypes.Thisstudy...

speciesisclearlyestablishedintheareaandisnowoverlappingwithothervectorssuchasAe....molecularconfirmationwascarriedoutusingaPCRtargetingthenicotinamide...

进行6个定点突变（是6个氨基酸，将这6个氨基酸图变成其他氨基酸），且各突变点之间有一定距离（如几百个碱基），用PCRoverlapping的方法一个点一个点进行突变太复杂了，对于在一个...

本人正在做一个酶的突变，使用的是overlappingPCR，但是上游总是P不出来，引物是没有问题的。而且在做第一个突变时没有发生过这种情况……求高手解答

利用OverlappingPCR技术，获得三串联目的基因并成功克隆入pET30a(+)载体中。经ITPG诱导获得大量表达，目的蛋白纯化酶切后仍具有抗菌活性，为抗菌肽的原核高效表达奠定了基础。

利用OverlappingPCR技术，连接合成片段，将连接好的核苷酸序列克隆入pET30a(+)载体中构建多重载体PET30a(+)-NK-16，经双酶切和PCR鉴定表明多重表达载体PET30a(+)-NK-16构建成功。多重表达...

哪位大侠指点一下overlappingPCR的相关注意问题啊，我用cDNA做模板短的可以就是长的我都要绝望了。只好试一下overlappingPCR了，从引物设计到具体的protocal都想请教一下，多谢了。