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生物科学
蛋白纯化踩坑避雷|GST 标签柱层析&Beads 实操经验
溶菌酶可配合
EDTA
(1mM)使用,增强细胞壁降解效果。2.离心与过滤破碎后菌液应呈半透明乳浊状。4℃,12,000rpm离心20min,小心吸取上清(避免扰动沉淀)。上清用0.45μm水系滤膜正压...
科研战神来了
2026-08-06 02:34
生物科学
如何优化你的ELISA实验?
例如用于包衣的抗原或抗体的浓度、温度、各个步骤的持续时间、包被缓冲液的类型,例如磷酸盐缓冲盐水(PBS)或碳酸盐缓冲液)、样品制备方法(有或没有
EDTA
、去互补、血清或血浆或整个样品...
晶莱生物
2026-08-04 08:43
文献求助
行标原文求助
不知道一次性使用人体静脉血样采集容器中添加剂量的测定方法第1部分:乙二胺四乙酸(
EDTA
)盐不是期刊2017123...
熙扬502
2026-08-03 02:35
分子生物
反应产物总提不上量?聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
客观说下使用中需要留意的点,方便大家提前规避问题:高浓度
EDTA
、尿素等变性剂会明显抑制酶活,配制体系时尽量控制螯合剂用量;不同反应体系、片段长短对应的最佳加酶量有区别,初次使用...
生物民工wws
2026-07-31 05:59
分子生物
做mRNA体外加帽,Cap0转Cap1效率不稳?分享一款2?-O甲基转移酶...
分享几个实操关键注意点,都是反复踩坑总结的:RNA反应前必须充分纯化,体系不能残留
EDTA
、高盐杂质,会严重抑制酶活;如果RNA5’端二级结构复杂,可把65℃变性时间延长到10min;SAM在37℃...
生物民工wws
2026-07-31 02:15
生物科学
ROS 染色信号弱、背景高?活性氧检测关键小 Tips
流式细胞仪:消化收集细胞(用不含
EDTA
的胰酶,避免淬灭),重悬于PBS,上机检测FL1通道的荧光强度,至少计数1×10?个细胞。特别叮嘱(血泪教训)阳性对照是“定海神针”:每次实验必须...
科研战神来了
2026-07-31 01:43
分子生物
【交流】做体外转录总卡在产量和纯度?分享一款实验室长期在用的...
体系里残留高浓度
EDTA
、变性剂会大幅压制酶活,模板洗脱后尽量除净残留;另外酶液不适合反复冻融,收到后建议分装成单次用量保存。市面上既能放大反应、又能控制杂链RNA的T7酶不算多,不少...
生物民工wws
2026-07-30 01:13
生物科学
HisTrap HP 亲和层析柱大家一般重复用多少次才换新的?
想请教一下版上经常用HisTrapHP亲和层析柱做蛋白纯化的朋友,你们一般一根柱子能用多少次才开始换新的,另外再生的时候用
EDTA
脱镍再重新挂镍的操作频率大概多久做一次比较合适?
2025dream
2026-07-27 07:35
生物科学
一文读懂细胞克隆形成实验|原理、操作要点与结果分析
加入0.25%胰蛋白酶(含
EDTA
)覆盖瓶底,37℃消化1~3min(显微镜下见细胞变圆、间隙增大即止)。立即加含血清培养基终止消化,用移液枪轻轻吹打(约20~30次,避免气泡),制成单细胞悬液。...
科研战神来了
2026-07-27 01:06
文献求助
Anal.Chem.2025,97,31,17242–17250
XuesongLiXiaohanZhangJinWangXiangyangWuZhenZhang*JuewenLiu*
EDTA
-MaskedTl+DetectionUsingaPairofNon-G-QuadruplexAptamerswithOppositeFluorescenceResponsesAnalyticalChemistryAnal....
cjh146
2026-07-20 08:15
生物科学
实验动物知识!大鼠尾静脉采血与注射标准操作指南
适配抗凝需求的
EDTA
、肝素采血管;75%医用酒精、碘伏、无菌医用棉签;止血纱布、大鼠专用固定筒与保定架;一次性无菌手套、实验垫巾;用于血管扩张的暖灯、温水,同时提前准备好样本标签与...
科研战神来了
2026-07-09 02:30
生物科学
养不好 293T?这份细胞培养实操要点请收好
一、传代步骤:细节决定细胞“心情”准备工作提前将DMEM完全培养基(高糖DMEM+10%胎牛血清+1%双抗)、PBS、胰酶(0.25%
EDTA
)从4℃取出,恢复至室温。胰酶太冷会延长消化时间,对细胞损伤大...
科研战神来了
2026-07-06 01:41
生物科学
如何实现成年小鼠骨组织的“超速”
EDTA
脱钙?
三、“超速”
edta
脱钙:从7天到24小时
edta
作为螯合脱钙剂,在保存组织形态、抗原性和核酸方面具有优势,但脱钙速度慢也限制了其在临床和科研中的应用。在实验过程中,我们也会通过多种手段...
义翘神州
2026-06-30 06:51
生物科学
CRISPR 高通量流式筛选踩坑总结:从建库到分选关键要点
【小源Tips】将细胞分成多份进行摇床染色,避免细胞量过多导致部分细胞无法被染色的情况,同时可以加入1-2mM的
EDTA
和25–50U/mLDNaseI以减少细胞聚团的现象。在分选前还需要用40μm筛网过滤...
我太秀了
2026-06-25 02:05
文献求助
文献求助
汪廷龙,郭惠优化
EDTA
滴定法测定铜冶炼烟尘中的铅湖南有色金属2025,41(03)130-134
may007
2026-06-23 07:00
电化学
磷酸锰铁锂合成
求助各位老师,我使用水热法合成磷酸锰铁锂但是一直没有成功cv扫不出峰,我的具体步骤是LiOH一水合物
EDTA
抗坏血酸MnSO4一水FeSO4七水按顺序溶解180℃10h然后真空干燥最后10:1加入葡萄糖,...
谁偷了我的小鱼
2026-06-18 02:29
文献求助
SD期刊论文 2022
KangGuEffectsofethylenediaminetetra-aceticacid(
EDTA
)anditsdisodiumsaltderivative(
EDTA
-Na)onthecharacteristicsofmagnesiumoxysulfate(MOS)cementCompositesPartB:Engineering2022...
一见钟情
2026-06-08 12:35
环境
水硬度检测仪用
EDTA
滴定法,终点颜色突变不明显,怎么解决?
'水质硬度检测仪'是自动滴定那种,用铬黑T指示剂。测低硬度水()时,终点颜色从紫红变蓝色很不明显,自动判断有时会失误。是不是低硬度下指示剂显色不足?水硬度检测仪有没有更灵敏的指示...
kingscom
2026-05-27 02:23
文献求助
求助文献一篇 有关四价锡和
EDTA
络合物
T.D.SMITHChelatesformedbyTinIVwithEthylenediamineTetraaceticAcidNature19621092
suzengquan
2026-05-18 05:50
文献求助
求助文献一篇 有四价金属的
EDTA
络合物
H.G.LangerSolidcomplexeswithtetravalentmetalionsandethylenediamimetetra-aceticacid(
EDTA
)JournalofInorganicandNuclearChemistry1964不详10.1016/0022-1902(64)80233-5
suzengquan
2026-05-18 05:06
生物科学
内切酶活性下降与失效的原因及解决方法
其他影响因素:实验室的"隐形杀手"还有一些不太明显但同样致命的因素:DNA样品中的杂质(如苯酚、氯仿残留)
EDTA
浓度过高(会螯合Mg??离子)甘油浓度过高(由于反复取用酶导致)反应体系中存在...
毕合生物2024
2026-05-12 05:45
生物科学
避坑必看:细胞拉丝千万别直接判定支原体污染
不含酚红(或含酚红但需记录)且成分明确(如
EDTA
浓度适中)。2.实际使用经验分享使用实例:HTR细胞(某滋养层细胞系)在37℃孵箱中消化3分钟即可完全脱落;即使HTR细胞延长至4天不传代,传...
科研战神来了
2026-05-11 07:24
药学
透明质酸酶的作用机制:如何实现药物递送
需要注意的是,Fe??、Fe??、Mn??、Cu??等重金属离子对透明质酸酶活性具有抑制作用,因此实验操作中应避免使用金属器皿或使用
EDTA
等螯合剂保护酶活性。透明质酸酶的化学结构不同来源...
瀚香生物
2026-05-06 08:20
生物科学
层析柱使用进阶技巧与常见问题解决方案
亲和柱再生:我通常使用
EDTA
、高浓度咪唑或低pH缓冲液进行强力洗脱,去除顽固结合的杂质&128313;离子交换柱:高盐(1-2MNaCl)洗脱+反向高盐洗脱的组合拳效果超赞!128313;疏水柱:尝试用10-...
毕合生物2024
2026-04-30 08:25
精细化工
三羟甲基氨基甲烷(Tris Base,CAS 77-86-1):生物缓冲剂核心...
主流应用领域详解核酸研究与电泳技术三羟甲基氨基甲烷是TAE(Tris-醋酸-
EDTA
)和TBE(Tris-硼酸-
EDTA
)缓冲液体系的核心组分[2][5]。TAE缓冲液适用于常规DNA琼脂糖凝胶电泳,因其缓冲容量...
前衍化学网
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