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HisTrap HP 亲和层析柱大家一般重复用多少次才换新的?
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| 实验室那根His Trap HP 亲和层析柱用了大概十几轮纯化了,最近几次感觉结合载量明显不如以前,同样量的菌液上样后流穿里目标蛋白越来越多,洗脱峰面积也缩水了不少。说明书上说结合载量能到40 mg/mL以上,粒径34 µm分辨率也确实不错,但用了这么多次之后载量下降是正常衰减还是我清洗再生没做到位?想请教一下版上经常用HisTrap HP 亲和层析柱做蛋白纯化的朋友,你们一般一根柱子能用多少次才开始换新的,另外再生的时候用EDTA脱镍再重新挂镍的操作频率大概多久做一次比较合适? |
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