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HisTrap HP 亲和层析柱大家一般重复用多少次才换新的？
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| 实验室那根His Trap HP 亲和层析柱用了大概十几轮纯化了，最近几次感觉结合载量明显不如以前，同样量的菌液上样后流穿里目标蛋白越来越多，洗脱峰面积也缩水了不少。说明书上说结合载量能到40 mg/mL以上，粒径34 µm分辨率也确实不错，但用了这么多次之后载量下降是正常衰减还是我清洗再生没做到位？想请教一下版上经常用HisTrap HP 亲和层析柱做蛋白纯化的朋友，你们一般一根柱子能用多少次才开始换新的，另外再生的时候用EDTA脱镍再重新挂镍的操作频率大概多久做一次比较合适？ |
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