应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【交流】HPLC交流交流，呵呵，有问题集中讨论嘛
1052/11返回列表上一页123456下一页末页
查看: 3472  |  回复: 104
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

885511

木虫 (著名写手)
★ ★
novus(金币+2): 很耐心的讲解，不愧是PhD兼DXY的老版主！欢迎常来药学版给新虫答疑解惑！ 2011-01-19 15:15:33
引用回帖:
Originally posted by huahua5 at 2011-01-10 17:13:52:



异丙醇因为粘度大，所以要小流速。我用0.1ml/min的流速走异丙醇，压力2.1MPa,走5个小时，应该可以吧？（柱子250*4.6mm，柱体积没算错的话应该是4ml多）。之后就可以直接走流动相了？还是需要走甲醇？

另 ...

氨基柱在含水量多的情况下是很不稳定的。也不宜在强酸的环境下使用。用的是缓冲液则先用水/乙腈清洗再用乙腈，.氨基住其本质属于正相柱，使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外，一般还采用乙腈-水作为流动相，但是要求乙腈的含量不得低于80%，含水过多的流动相对氨基柱有损害，一般尽量不要用含水过多流动相。建议用小流速的异丙醇冲洗过夜试试。氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的，这一点很多用户都已经知道；但是要注意到的是：正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的，对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。NH2柱是在硅胶上键合一个5碳NH2;CN柱是在硅胶上键合一个5碳CN基;NH2.CN都为两相柱.
对于新购买到的柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。反相条件下使用时，要特别注意控制PH值范围，PH值越低越有发生水解的危险，流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以，在使用后以及准备长时间放置该柱时，必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
简单说起来，正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法；反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。
平时在正相条件下使用：
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗，因异丙醇粘度较大可适当放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之后，用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相，即可。
平时在反相条件下使用：
缓冲盐应及时冲洗，以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等，属常识就不作特别交待了。
用50倍纯甲醇冲洗；之后，用异丙醇过渡后，用二氯甲烷冲洗色谱柱；之后，再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。
这些清洗方法，主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法，色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-01-10 20:19:30
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huahua5

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗，因异丙醇粘度较大可适当放低流速；之后，用50倍的甲醇清洗；之后，用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相，即可。

本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2769610&fpage=0&view=&highlight=&page=2

我用异丙醇冲洗了，现在正在用甲醇冲洗。
之后用异丙醇过渡回到流动相，这个过渡要冲洗都久呢？
为什么要用异丙醇过渡？直接用流动相不可吗？我以前做完样品，用甲醇冲洗30分钟，之后下次再做样品，直接走流动相？这样有问题吗？
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-01-13 09:03:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
买了半年多的制备液相，之前很好用
目前的问题是流速不稳，压力也是上下波动，经确认是管路没有气泡
请问是泵单向阀脏了吗？还是垫磨损了？
解决方法有那些？
赞一下(1人) 回复此楼
欢迎您来药学版~
13楼2011-01-13 09:29:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

885511

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaodu2007693 at 2011-01-13 09:29:39:
买了半年多的制备液相，之前很好用
目前的问题是流速不稳，压力也是上下波动，经确认是管路没有气泡
请问是泵单向阀脏了吗？还是垫磨损了？
解决方法有那些？

制备液相还是请工程师来瞧瞧，这个只是用过，没拆过，呵呵，这个比较贵
赞一下 回复此楼
14楼2011-01-13 09:47:41
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请教，配制流动相是用纯化水还是蒸馏水，谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-01-28 14:30:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

885511

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wlsky at 2011-01-28 14:30:12:
请教，配制流动相是用纯化水还是蒸馏水，谢谢

用蒸馏水过滤一下，再超一下就可以用了，当然可以直接用MILQ的水了，呵呵，水要保持新鲜，当天去蒸馏水用
赞一下 回复此楼
16楼2011-01-28 16:32:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粉色玉米

木虫 (著名写手)

笨笨的乖傻傻~
学习了、、、
回复此楼
下一站的幸福。。简单、单纯。
17楼2011-01-28 21:11:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

885511

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 粉色玉米 at 2011-01-28 21:11:00:
学习了、、、

一起讨论讨论嘛，一起提高
赞一下 回复此楼
18楼2011-01-28 21:26:11
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

粉色玉米

木虫 (著名写手)

笨笨的乖傻傻~
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 885511 at 2011-01-28 21:26:11:

一起讨论讨论嘛，一起提高

我刚接触、、、以后有问题过来讨教、、
我们一般用的安捷伦那个hplc 以后遇到问题来向前辈交流、、、
赞一下(1人) 回复此楼
下一站的幸福。。简单、单纯。
19楼2011-01-29 12:16:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maliyuan

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
20楼2011-01-29 15:56:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 885511 的主题更新
1052/11返回列表上一页123456下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件) SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 招聘催化、储能博士 +8 dfjsf 2024-05-24 12/600 2024-05-29 11:23 by one time
[论文投稿] 核心初审被拒，理由是“选题的意义不明确，文章写得不像是科技论文”，怎么改 5+3 工藤雷花樱 2024-05-27 8/400 2024-05-29 10:09 by topedit
[教师之家] 中年 +8 459582015 2024-05-28 9/450 2024-05-29 08:44 by tangfh1973
[找工作] 找工作如此之难 +6 探123 2024-05-25 6/300 2024-05-29 08:11 by SNaiL1995
[教师之家] 女博士高校择业三天之内签合同，求支招 +40 chengmy19 2024-05-23 57/2850 2024-05-29 07:54 by hhbaust
[基金申请] 讨论贴：好本子一定会被打招呼的淘汰吗 +29 ioe3937 2024-05-27 37/1850 2024-05-29 07:22 by kldb880
[教师之家] 被惯着的学生终究要吃大亏 +28 535743368 2024-05-24 30/1500 2024-05-28 21:51 by lyfbangong
[有机交流] D-阿拉伯糖-1，4-内酯的合成 2+4 Leeu55 2024-05-24 12/600 2024-05-28 21:17 by Leeu55
[基金申请] 信息学部函评结束了吗？ +5 ducan21 2024-05-28 6/300 2024-05-28 20:12 by nending2
[基金申请] E05青基有几个评审 +4 KYXY123 2024-05-28 4/200 2024-05-28 19:25 by popt2t
[基金申请] E10开始送了，希望有好运 +5 sail 2024-05-27 5/250 2024-05-28 18:36 by 芝小芝
[硕博家园] 文科博在木虫上存在感好低呀 +8 hahamyid 2024-05-25 11/550 2024-05-28 15:28 by cqu_zzh
[硕博家园] 要不要读博 +13 王乔木 2024-05-24 14/700 2024-05-28 13:31 by 905452934
[电化学] 2200mA锂离子电池设计 +5 小乐987 2024-05-23 5/250 2024-05-28 10:02 by 打工艺术家
[硕博家园] 每天学术时间不能保证，能保证的只有： +5 hahamyid 2024-05-27 5/250 2024-05-27 18:18 by 沉默如昔
[硕博家园] 我是很理想化一人 +6 hahamyid 2024-05-26 6/300 2024-05-27 18:13 by 大飞鱼鱼鱼
[考博] 25年博士申请 +7 zjc晨 2024-05-24 10/500 2024-05-27 15:25 by 82年拉菲
[基金申请] 化学B口多少分能上会呀 +7 WOWO159357 2024-05-22 17/850 2024-05-24 09:00 by 一路向东
[有机交流] 苯磺酰氯与醇羟基反应 5+4 杨怼怼? 2024-05-22 12/600 2024-05-23 15:59 by mrzhl1986
[考博] 邀请申请深圳大学计算机与软件学院专业学位博士研究生(具身智能机器人方向) +3 Qiang_Li 2024-05-22 5/250 2024-05-23 14:28 by Qiang_Li
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭