各位科研好友，现在小弟遇到一个这样的问题：我需要在PUC19质粒上连接一个Knamx，两个同源臂片段，共三个片段，然后对酵母上某个基因进行中断。...一个为226bp，请问这么小的同源臂在作重组时...

本人用RED重组系统敲除大肠杆菌BL21(DE3)以及JM109(DE3)...设计一对5端含有50nt目的基因同源区的引物，以此引物和质粒pKD3进行PCR扩增,得到中间含有氯霉素抗性基因的PCR产物，称之为打靶片段。...

最近准备利用同源重组做链霉菌的基因阻断，有两个问题向有经验的高手请教：...2）在构建敲除的质粒时，通过PCR得到左右两个同源臂，利用引物设计时两端酶切位点连接在一起，这样在同源重组时...

目前正考虑做细菌的基因敲除，打算用定点同源重组技术进行。...问题3：我总结了一下用自杀质粒进行细菌基因敲除的一般步骤，大家看看是否正确：首先获得同源基因的序列并通过PCR获得变异序列...

进行人类同源分子的功能分析，利用各种肿瘤细胞系和裸鼠模型，研究新细胞自噬分子与肿瘤细胞生物学行为之间的联系，制备细胞自噬...本项目围绕细胞自噬研究中关键的科学问题细胞自噬的分子机理...

我现在在使用red同源重组对大肠杆菌进行基因敲除，使用的方法是常用的两步法。第一步通过电转含有左右同源臂的cm-sacB片段到细胞中，通过Cm平板筛选重组菌，然后通过PCR...问题是：...

我在实验过程中遇到的问题是：转化A+KanMX+B这个片段进入酿酒酵母基因组（A,B片段分别是酿酒酵母X基因外部...另一方面，KanMX片段同源重组替换了酵母染色体上的X基因，从而实现该基因的敲除。...

最近用lamdaRED重组敲除大肠杆菌乳酸脱氢酶基因。可是一直出问题，分析不出来问题出在哪里，所以向各位大侠请教。以下是我的...1、用带有45bp同源臂的引物，PCR扩增卡那霉素或氯霉素基因；...

2.简述基因敲除小鼠模型的策略。协和医科大学2004年...反义RNARNA编辑有义链同功tRNA基因转换二、简答题1、如果一段DNA序列的两端为反向重复序列，若发生同源重组将会产生什么结果？...