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分类	共搜索到 135 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	overlap pcr overlappcr，Taq酶和KOD条带不一样，KOD没有目标条带但是Taq有目标条带，想问问大家。求求了	FRUNCE	2023-08-15 07:29
分子生物	overlap pcr 求助:做overlap，A基因634bp，B基因264bp，A+B基因扩出来全长应该在900bp左右，但是扩出来的条带只有750bp，请问是什么原因呢。A和B均是用的胶回收产物去overlap，A的下游和B的上游有25bp...	烟花为絮	2023-03-13 01:23
分子生物	载体构建，overlap pcr 有没有大佬能解答我一个问题，就是我想构建一个稳转载体，然后用来侵染四突，现在我这边就是想双酶切一个现有载体，得到一个带强启动子的载体，然后把目的基因和3×FLAG连起来，再和带强...	读书ingbs	2022-11-26 09:07
分子生物	overlap-pcr 我想将五段单独的DNA序列,连成一段完整的DNA序列，可以用overlap-pcr么	85888888	2022-03-01 01:15
分子生物	overlap PcR 进行启动子扩增最近在扩启动子。普通方法怎么都扩不出，想请教下大家怎么用overlapPcR设计引物去扩启动子。麻烦惹	Zandraa	2021-07-14 02:28
硕博家园	切胶回收有杂条带切胶回收，总是有大于目的片段的杂条带。目的片段1500bp左右，回收前...用于后续overlap，其产物也有大于目的片段的杂条带。求大家指点迷津啊啊啊啊啊啊，孩子要疯了！pcr结果切胶回收后验证	雅黑嘿呀	2021-04-27 05:45
虫友互识	求助overlap pcr引物设计问题我想把两个基因通过overlappcr方法连在一起，Agene引物是F1/R1，B基因引物是F2/R2，后期构在过表达载体（酶切位点是bamhI和sacI）上，使两基因共同起作用，是不是必须插入linker区或者每个...	成功逆袭中	2021-03-21 06:41
分子生物	第二次overlap目标条带浅最近做pcr，想将ABC三个片段连在一起，现在已经成功的讲AB和BC连在一起，最后一就是将AB和C或者BC和A连在一起。最后跑胶出来的结果最亮的条带总是C或者A的长度，ABC的长度较弱。也试过将ABC...	日落沙发	2019-12-11 01:03
分子生物	Overlap PCR求助由于试验需要，要用到OverlapPCR技术，但第一次接触不知道如何操作，有大佬可以指点一下吗，推荐试剂盒什么的～	njauzyc	2019-10-08 02:54
分子生物	overlap PCR 有一个大约10kb的片段，分成两段，用PCR扩增出来了，且两片段之间有25BP的同源臂，现在用overlapPCR一直扩不出目的片段，出现了非特异型扩增，primer用的还是原来的，一个片段的上游引物，...	Misterboy	2019-05-07 01:35
分子生物	overlap pcr具体过程最近要合成一个126bp的基因，直接用...已经设计了一对引物，但是后面用的pcr温度，循环数，酶什么的，保存啊一头雾水（研一刚接触这么东西所以）。有可以给我说说后面具体该怎么操作的大神？	星庭光耀	2019-03-26 02:03
硕博家园	overlap PCR 想问下各位，图中以质粒为模板，以1和2为引物，其中酶切位点为BamHI.两个引物上都有BamHI.模板上只有一个，请问可以PCR吗，还有质粒需要酶切吗	青柠檬PCR	2018-09-30 05:15
分子生物	求助大家啊，Overlap pcr连接不上如下	yuevis	2018-08-27 04:57
分子生物	overlap连接片段大小正确，连T载体后片段大小错误求助，本人用overlap的方法，将三个片段连起来并切胶回收，然后连T载体转化大肠杆菌，随后菌液PCR并电泳验证插入条带的大小，但是目标条带应该是2000bp，overlap片段重连大小是1946bp，跑...	burma9	2018-07-10 01:50
分子生物	PCR 问题 4.1 K 的CDS全长怎么也扩不出来一个4.1K的CDS全长怎么也扩不出来，换用overlap方法扩，在2k位置设计了引物，前半段又怎么也扩不出来，尝试了换酶、buffer、退火梯度、检测了所有用到的东西（用同样的酶、模板扩了另一个...	不鸣鸟	2018-04-04 11:05
分子生物	两条有重叠的DNA单链可以作为pcr的primer产出双链DNA吗？我有两条dna单链，大概有20个base的overlap。现在我想得到双链的DNA，可以用这两条链作为primer吗？我没有模版，双链DNA的长度就是两条单链加起来减去一个中间overlap的长度，谢谢	jiao1123	2018-03-20 10:32
分子生物	overlap pcr 求指导我做的overlappcr这是我设计的引物，先试用p1p2，p3p4分别扩增了同源片段在通过overlappcr将两个同源片段连接起来，下面是我设计的引物、...是我引物的问题还是pcr条件的问题呢？求指导	hemary	2018-02-01 12:20
分子生物	PCR出不来目的条带我想overlappcr把上下同源臂和目的基因连在一起，从基提取的细菌基因组上扩增上下同源臂，没有目的条带，有很多比目的条带小或者接近的杂带，请问这是怎么回事啊，很急啊，我的引物是这样...	yuevis	2017-11-29 03:40
分子生物	关于overlap pcr的引物问题我要连接两个片段的话，应该是4个引物，1F，1R，2F，2R，其中1R和2F因为有重叠片段，所以比较长，Tm值也比较高。先p两个片段，如果用1F和1R，2F和2R分别p两个片段，那么他们分别的退火温度...	yuevis	2017-11-21 01:43
文献求助	求文献~有链接~1114-2 mutagenesisbyPCR-drivenoverlapextensioninfo'.2.'][info3]NatureProtocolsinfo'.3.'][info4]2007info'.4.'][info5]NatureProtocols2,924–932(2007)info'.5.'][info6]doi...	Jiao4333303	2017-11-14 09:37
分子生物	小白的PCR历程在基因合成还是很贵的年代，OverlapPCR还是非常吃香的，多次利用OverlapPCR可以合成长的DNA片段。现在合成很便宜了，这里就不赘述。利用OverlapPCR还可以构建敲除所需的打靶片段。很多...	莫落	2017-11-08 04:14
生物科学	RCR primer design，Tm 及我们设计的引物要分为两段一段和ER匹配（长度21nt）一段和质粒匹配用于重组（15nt）（overlapextensionPCR）4.用oligo找引物我们先不管那15nt按照21nt的标准找最终我们在36bp-56...	RubyRose	2017-08-26 02:58
分子生物	关于构建重组质粒我用overlapPCR做出一段1kb的片段，片段两端分别设计了BamHI和SacI酶切位点，载体原长6800bp，用BamHI和SacI切掉40bp暴露黏性末端，切完跑胶验证是切断的。用T4连接酶连接到载体上，然后...	焦毅	2017-07-22 01:47
文献求助	Fusion PCR via novel overlap sequences PCRvianoveloverlapsequencesinfo'.2.'][info3]InGeneSynthesisMethodsandProtocols,PeccoudJ(ed).Humana:NewYorkinfo'.3.'][info4]2012info'.4.'][info5]97–110info'...	liaoya7	2017-07-18 03:25
硕博家园	有人做过overlap PCR吗？求助求助大神[发自小木虫android客户端]	zkapan	2017-07-12 02:45