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分类 共搜索到 1206 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 干货分享｜PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
要分析遇到的问题，除了考虑必要的仪器外，需要明确PCR（聚合...3.非特异性扩增——条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因：引物的特异性不强、提取模板DNA中可能会有非靶基因性同源...
 科研实验_研实 2024-04-26 06:53
医学 PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
除了序列同源性，引物还必须考虑到其它相关问题，以确保PCR扩增的特异性。首先，引物序列的熔解温度（Tm）必须在55–70℃之间，两种引物的Tm相差不超过5℃。同样重要的是，引物的序列不能...
 医学验证123 2024-04-19 05:31
生物科学 分子克隆实验——无缝克隆
[交流]无缝克隆常见问题解答无缝克隆常见问题解答分子克隆...?相同抗性的质粒污染：以质粒为模板进行插入片段PCR扩增时，使用预线性化质粒作为扩增模板，使用DpnI等甲基化敏感型内切酶对扩增...
 科研战神·王 2024-04-19 02:31
分子生物 干货分享|此FISH非彼FISH，这是荧光原位杂交技术
NGS对实验室要求高，同时存在检测周期长和检测费用高等问题；...FISH技术可以在间期细胞核上找到DNA扩增的直接证据，而且间期细胞核所显示出的扩增DNA荧光信号的数量多少及荧光强度常与DNA扩增...
 科研顾问_Gu 2024-04-19 01:49
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml)，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可造成假阳就可形成假阳性。...
 基础生物实验外 2024-04-15 01:54
分子生物 干货分享|PCR实验，需要哪些组分/条件，值得收藏！
除了序列同源性，引物还必须考虑到其它相关问题，以确保PCR扩增的特异性。首先，引物序列的熔解温度（Tm）必须在55–70℃之间，两种引物的Tm相差不超过5℃。同样重要的是，引物的序列不能...
 科研顾问_Gu 2024-04-12 09:23
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
要分析遇到的问题，除了考虑必要的仪器外，需要明确PCR（聚合...3.非特异性扩增——条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因：引物的特异性不强、提取模板DNA中可能会有非靶基因性同源...
 基础生物实验外 2024-04-10 12:42
分子生物 基因敲除的原理与方法
目前常用的方法是正负筛选法(PNS法)，标记基因的特异位点表达法以及PCR法。其中应用最多的是PNS法。⑤.表型研究...directedRNApolymerase，RdRP)的作用下自身扩增后，再被Dicer酶裂解成siRNA。...
 科研战神·王 2024-04-03 03:16
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml)，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可造成假阳就可形成假阳性。...
 科研战神·王 2024-04-02 05:55
分子生物 地高辛标记探针技术
少量的基因组DNA(1ng～50ng)便可直接通过PCR进行扩增、标记。4地高辛标记探针的显...由于地高辛类产品存在的上述问题，导致国内同类产品存在质量低下、批次不稳定的问题，而进口产品价格高昂。
 长沙瀚辰生物 2024-04-01 07:30
微生物 基因敲除实验求助
有一次电转后将双抗板（20ug/ml四环素+4ug/ml美罗）上的出现...还有一个问题得到单交换菌株后，用无抗性液体培养后稀释1000倍再涂布蔗糖平板，再利用原始野生株包含目的基因上下游片段进行PCR...
 小鸡腿a 2024-03-31 12:31
生物科学 PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析
PCR和凝胶电泳实验结果常见问题及原因分析为了排除某些因素对PCR结果的影响，PCR实验需要对照实验。...3.非特异性扩增——条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因：引物的特异性不强、...
 科研战神·王 2024-03-29 01:33
分子生物 干货分享|液相如何改善峰形与提高分离度！
秘诀3：粗调转微调RT-PCR是逆转录PCR，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增，结果只能定性，不能定量。...易挥发的无色液体，有氨的气味。...
 YX科研小助理 2024-03-25 01:12
硕博家园 构载体问题
载体老是连不上该咋整啊，序列大小扩增出来是对的，载体我都换了3次了，引物和序列我在连接之前也PCR检测过，都是有的，载体也证明...我能想到的原因我都改了，现在实在不知道怎么办了，有没有...
 编号89757? 2024-03-18 08:08
生物科学 无缝克隆常见问题解答
无缝克隆常见问题解答分子克隆实验——无缝克隆今天和大家讲...?相同抗性的质粒污染：以质粒为模板进行插入片段PCR扩增时，使用预线性化质粒作为扩增模板，使用DpnI等甲基化敏感型内切酶对...
 科研战神·王 2024-03-18 01:38
生物科学 干货分享|无缝克隆常见问题解答
分子克隆实验——无缝克隆今天和大家讲讲无缝克隆常见的问题...?相同抗性的质粒污染：以质粒为模板进行插入片段PCR扩增时，使用预线性化质粒作为扩增模板，使用DpnI等甲基化敏感型内切酶对...
 实验助手 2024-03-15 09:06
分子生物 基因敲除的原理与方法
目前常用的方法是正负筛选法(PNS法)，标记基因的特异位点表达法以及PCR法。其中应用最多的是PNS法。⑤.表型研究...directedRNApolymerase，RdRP)的作用下自身扩增后，再被Dicer酶裂解成siRNA。...
 科研战神·王 2024-03-14 07:59
分子生物 干货分享|RT-qPCR中的定量策略详解
即使扩增碱基序列相同，但整体模板不同，也有可能导致PCR扩增效率不同（比如基因组DNA和质粒DNA等）。...9、总结用于可靠的mRNA或microRNA定量策略必须根据需要解决的生物学问题去设计。...
 YX科研小助理 2024-03-14 02:43
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml)，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可造成假阳就可形成假阳性。...
 科研战神·王 2024-02-28 12:40
微生物 常用PCR技术及原理
PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的...
 MDL医学实验 2024-02-19 08:19
生物科学 PCR实验曲线异常的常见原因及处理方法！
很多老师会遇到异常扩增曲线的困扰，PCR实验曲线异常的常见原因都有哪些？...常见的耗材相关问题包括：1）错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材一般透光度比较差，会造成荧光扩增曲线...
 球场下雪了 2024-02-05 01:50
分子生物 质粒提取纯化柱与PCR产物纯化柱是否可以混用？
在细菌中提取质粒DNA通常按照以下步骤进行:第一步，培养细菌，使质粒扩增;第二步，进行细菌的收集...会出现这个问题是由于实验室常用的质粒提取试剂盒和PCR产物回收试剂盒的纯化柱经常就少了。...
 球场下雪了 2024-01-31 01:20
微生物 不同血清型沙门菌PCR产物降解速率差异问题
各位老师，有没有遇到不同血清型沙门氏菌PCR扩增同一个靶标基因，放置冰箱冷藏后有些血清型的PCR产物降解了。求助各位老师，是否曾经碰到，背后的机理是什么，可以给我推荐一些文献，谢谢！
 ahx512 2024-01-26 02:59
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