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分类 共搜索到 1213 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 基因敲除的原理与方法
目前常用的方法是正负筛选法(PNS法),标记基因的特异位点表达法以及PCR法。其中应用最多的是PNS法。⑤.表型研究...directedRNApolymerase,RdRP)的作用下自身扩增后,再被Dicer酶裂解成siRNA。...
科研战神·王 2024-03-14 07:59
分子生物 干货分享|RT-qPCR中的定量策略详解
即使扩增碱基序列相同,但整体模板不同,也可能导致PCR扩增效率不同(比如基因组DNA和质粒DNA等)。...9、总结用于可靠的mRNA或microRNA定量策略必须根据需要解决的生物学问题去设计。...
YX科研小助理 2024-03-14 02:43
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。...
科研战神·王 2024-02-28 12:40
微生物 常用PCR技术及原理
PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就一个荧光分子形成,实现了荧光信号的...
MDL医学实验 2024-02-19 08:19
生物科学 PCR实验曲线异常的常见原因及处理方法!
很多老师会遇到异常扩增曲线的困扰,PCR实验曲线异常的常见原因都哪些?...常见的耗材相关问题包括:1)错误使用成普通PCR仪器所对应的耗材普通PCR耗材一般透光度比较差,会造成荧光扩增曲线...
球场下雪了 2024-02-05 01:50
分子生物 质粒提取纯化柱与PCR产物纯化柱是否可以混用?
在细菌中提取质粒DNA通常按照以下步骤进行:第一步,培养细菌,使质粒扩增;第二步,进行细菌的收集...会出现这个问题是由于实验室常用的质粒提取试剂盒和PCR产物回收试剂盒的纯化柱经常就少了。...
球场下雪了 2024-01-31 01:20
微生物 不同血清型沙门菌PCR产物降解速率差异问题
各位老师,没有遇到不同血清型沙门氏菌PCR扩增同一个靶标基因,放置冰箱冷藏后有些血清型的PCR产物降解了。求助各位老师,是否曾经碰到,背后的机理是什么,可以给我推荐一些文献,谢谢!
ahx512 2024-01-26 02:59
生物科学 质粒提取的小技巧
双酶切制备克隆插入片段的载体,最好选择带外源片段的质粒,是否酶切完全,从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断...8.PCR扩增产物的克隆引物设计主要是要注意以下几个事项:(1)发夹结构;...
Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
分子生物 推动数字PCR在实验室中的普及:面临的挑战与应对之道
pcr技术在生命科学研究中的地位举足轻重,几乎所有生物学及医学相关的科研机构都配备荧光pcr仪,来实现dna扩增和核酸定性检测,...数字pcr面临的问题现有的数字pcr仪器普遍存在以下问题:(1)...
Turtle_tech 2024-01-25 03:16
分子生物 较长基因的慢病毒过表达载体构建不成功
获得方法为使用带同源臂的引物从cDNA中扩增,退火温度为经过...当我使用普通的、非高保真taq酶扩增出来的目的片段,又可以在上述某试剂盒作用下与载体连接,菌落PCR阳性,但测序提示会错义...
tianyu1201 2024-01-19 07:46
生物科学 肺炎支原体,你了解多少
学龄前儿童的上呼吸道感染性疾病中约5%是肺炎支原体引起,儿童和青少年扁桃体炎的MP检测阳性率约为5%~16%,而10%~40%的MP呼吸道...2.PCR检测:病原体DNA:扩增病原体DNA,感染状态,定植,死...
球场下雪了 2024-01-16 01:20
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。...
科研小努力 2024-01-06 03:20
生物科学 假阳性?条带不对?菌液PCR问题一网打尽!
产生原因及解决办法:(1)未连接到载体的目的片段仍存在在菌液里,单克隆的菌落为原始质粒,菌液PCR有条带。(2)污染。出现这种情况的原因包括:①菌液污染。②酶,引物,Buffer等污染。...
球场下雪了 2024-01-04 02:34
考博 深圳湾实验室招聘研究助理,优秀可推荐申请博士研究生
在深圳湾实验室,重大疾病问题与前沿学科技术互为经纬,以...拥有高通量测序仪、共聚焦显微镜、双光子显微镜、lavision光片扫描显微镜、电动倒置荧光显微镜、流式细胞分选系统、pcr扩增仪、...
heyide 2024-01-04 02:22
招聘信息布告栏 深圳湾实验室细胞周期与基因组稳定性课题组博士后、研究助理招聘
在深圳湾实验室,重大疾病问题与前沿学科技术互为经纬,以...拥有高通量测序仪、共聚焦显微镜、双光子显微镜、Lavision光片扫描显微镜、电动倒置荧光显微镜、流式细胞分选系统、PCR扩增仪、...
heyide 2023-12-26 09:15
博后之家 深圳湾实验室细胞周期与基因组稳定性课题组博士后招聘
在深圳湾实验室,重大疾病问题与前沿学科技术互为经纬,以...拥有高通量测序仪、共聚焦显微镜、双光子显微镜、lavision光片扫描显微镜、电动倒置荧光显微镜、流式细胞分选系统、pcr扩增仪、...
heyide 2023-12-26 09:46
生物科学 液相如何改善峰形与提高分离度!
秘诀3:粗调转微调RT-PCR是逆转录PCR,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增,结果只能定性,不能定量。...易挥发的无色液体,氨的气味。...
科研小努力 2023-12-22 05:03
分子生物 分子实验室核酸污染的救星——Nucleic Acid Cleaner
收集标本的容器被污染,或标本放置时密封不严溢于容器外,或容器外附着标本而造成相互间交叉污染;b.在提取标本核酸过程中,...3、PCR扩增产物污染:这是PCR应用中最主要最常见的污染问题。...
Mickbawk 2023-12-13 06:24
分子生物 RNA反转录
其为从真核生物mRNA构建cDNA文库、全长cDNA克隆和cDNA3'末端快速扩增(3'RACE)的最佳选择。由于oligo(dT)引物对poly(A)尾的特异性,其不...例如,高估mRNA拷贝数就是一个需要考虑的问题[5]。...
科研小努力 2023-11-21 03:52
分子生物 PCR反应污染的原因?
1、标本间交叉污染:标本污染主要收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,...3、PCR扩增产物污染....
科研小努力 2023-11-08 08:55
招聘信息布告栏 北京海淀 微生物研发总监及专员招聘
【研发总监】1人一、岗位职责1、菌株库建设组织开展菌毒株扩增、定期复苏、菌种保藏、对外菌毒株菌种制作。2、知识产权(1)...(8)负责实验室日常卫生、用水、用电、化学试剂等安全问题;...
flysky97 2023-10-23 01:24
分子生物 实验中心科普:RNA反转录
其为从真核生物mRNA构建cDNA文库、全长cDNA克隆和cDNA3'末端快速扩增(3'RACE)的最佳选择。由于oligo(dT)引物对poly(A)尾的特异性,其不...例如,高估mRNA拷贝数就是一个需要考虑的问题[5]。...
球场下雪了 2023-10-19 01:12
生物科学 干货分享|RNA反转录
其为从真核生物mRNA构建cDNA文库、全长cDNA克隆和cDNA3'末端快速扩增(3'RACE)的最佳选择。由于oligo(dT)引物对poly(A)尾的特异性,其不...例如,高估mRNA拷贝数就是一个需要考虑的问题[5]。...
李英华001 2023-10-19 01:34
分子生物 干货分享|PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
3、PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要的污染问题.因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。...
球场下雪了 2023-10-13 01:12
分子生物 干货分享|招招解决qPCR曲线的疑难杂症
甚至还有其他千奇百怪问题,令人头大~01什么是扩增曲线和熔解曲线对于荧光定量PCR结果的判断,最直观就是看扩增曲线是否「漂亮」,即扩增...快来看下你没有遇到过同样的问题吧~扩增曲线...
球场下雪了 2023-10-10 01:57