应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » OPA测水解度的问题
51/1返回列表
查看: 2674  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

毛阿毛

金虫 (正式写手)

[求助] OPA测水解度的问题 已有2人参与

求助求助，各路有经验的达人，非常希望 可以 不吝赐教！！！ 此问题已困扰本人许久，着实抓狂，食不知味，夜不能寐。。。还望有经验的小伙伴可以指导1,2.。。。。先行谢过！！！

具体问题如下—

底物 100ml 乳清蛋白， 胰蛋白酶。
现比较 pH/Stat 方法 和OPA测水解度的方法。 采用 pH stat 记录base的消耗量，从而计算水解度，在不同的 Time intervals 取1ml 水解物 与0.5ml抑制剂混合后，dilute 10倍，采用OPA试剂与其反应，340nm处测量absorbance. 理论上吸光度应随着水解度的increase而增加，但事实上 数据非常混乱，未水解 底物的 吸光度竟然高于水解产物。
配置了不同浓度的乳清蛋白与lysine标注曲线，线性增长十分理想，这说明opa试剂不应存在问题，而且吸光度均在0.1至1之间，也属正常，但水解物的吸光度就是十分奇怪，无法观察到增长趋势。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-02-24 00:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小天天298

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 毛阿毛 at 2016-02-24 16:36:22
我也看到很多papers 都有用OPA来测水解度，也看到测定乳清蛋白的水解物， 试了好几次，实在是想不明白  问题出在哪里了。。。然后OPA 也可以通过测fluorescence 测氨基的数量，所以我也试了fluorescence,发现一测水 ...

我想问一下TNBS法好测吗？我之前用过茚三酮法，没测出来，求指教！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-09 07:31:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

不改我心

金虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
sytucom: 应助指数-1, 无效应助，请认真回答楼主问题。 2016-02-24 09:59:01
加油！看好你！黑金币吧😄

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2016-02-24 04:13:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
毛阿毛(sytucom代发): 金币+5, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-02-25 23:13:21
没做过OPA测水解度的，但这个方法很常见。但因为有毒，所以我使用TNBS法，这个没有毒，还比较稳定。
赞一下 回复此楼
3楼2016-02-24 09:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛阿毛

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 是水货 at 2016-02-24 09:04:42
没做过OPA测水解度的，但这个方法很常见。但因为有毒，所以我使用TNBS法，这个没有毒，还比较稳定。

我也看到很多papers 都有用OPA来测水解度，也看到测定乳清蛋白的水解物， 试了好几次，实在是想不明白  问题出在哪里了。。。然后OPA 也可以通过测fluorescence 测氨基的数量，所以我也试了fluorescence,发现一测水解物 就找不到规律。。。。。唉， 之前没考虑用TNBS 是觉得这个耗时长，因为每次样品都会比较多
赞一下 回复此楼
4楼2016-02-24 16:36:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 11:47 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:11 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 04:05 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 5/250 2026-11-15 03:21 by xSrQNSSjcgoX
[文学芳草园] 厉娜 +4 张丹枫1991 2026-11-09 6/300 2026-11-15 00:48 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +6 锦鲤送福至 2026-11-10 6/300 2026-11-14 21:23 by xupeii
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:13 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:20 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:09 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 11/550 2026-11-12 09:57 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:41 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:42 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 8/400 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭