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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA 提取中 避免RNase 污染问题。
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墨色尘嚣

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA 提取中 避免RNase 污染问题。 已有8人参与

各位虫友，

我想问一下用trizol 方法提取RNA 时候，装chloroform，isopropanol，75%的 ethanol 的酒精（Rnase free water）的试剂瓶可否用普通的灭菌管来装，因为都是从大容器里面直接倒出到小试剂瓶里分次用，现在有点担心这些装他们的瓶瓶罐罐是否有大问题。另外没有 RNA working station 直接在实验室环境中进行RNA 提取，是否有大问题？
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1楼 2016-02-17 06:35:22
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skull123

木虫 (正式写手)
★
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提取RNA，用trizol法其实在超净台里就ok了，没有超净台也问题不大。除非你要提取的目标RNA含量非常非常少，不然大部分情况下都ok，使用的时候戴口罩，勤换一次性手套。

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2楼2016-02-17 08:29:09
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skull123

木虫 (正式写手)
试剂最好直接买500ml一瓶未开盖的开盖了直接专一使用，不分装。

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3楼2016-02-17 08:31:06
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skull123

木虫 (正式写手)
★
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ep管、枪头等耗材也买已经depc处理好的现货使用

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4楼2016-02-17 08:32:03
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a314919473

银虫 (著名写手)
★
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可以分装试剂，超净台提取即可，放开做就行，别太担心这个那个的。
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有你真好
5楼2016-02-18 12:33:13
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flyy1986

铜虫 (小有名气)
★
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我们这儿有RNA检测试剂盒，不需要提取RNA，两小时内即可出结果。欢迎试用。超级简单！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2016-02-18 14:45:15
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lywac

铜虫 (小有名气)
★
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最好不要分装，做RNA的和其他的区分开，基本上是没有问题的
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等你，是我一生的承诺
7楼2016-02-18 14:58:46
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缝隙中的阳光

银虫 (著名写手)
★
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记得我提取的时候是没有专门分装的，不过你在提取过程中用到的p管、枪头等耗材都需要用depc水自己处理或者买已经被处理的p管、枪头等耗材。。

另外最好是要在超净工作台上进行，提取过程中勤换手套，戴口罩提取的过程中尽量少说话，另外，在加入反应液反应管静置反应的那段时间最好将反应管放在4°冰箱或者放在冰上这样最好。。

另外每个反应管在使用前，都最好先预冷一下，我是放在液氮中预冷的。。
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……
8楼2016-02-18 15:25:26
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zzhua94

金虫 (初入文坛)
★
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所用的枪头和EP管最好都要经过处理的，另外试剂，离心机等也是提RNA专用的，在超净工作台内，冰上提取比较好，动作要快。

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9楼2016-02-18 16:34:25
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nieyuan1s

铜虫 (小有名气)
★
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最好与RNA接触的器材都需要DEPC或者NAOH处理去核酶的。溶液有的需要提前预冷。口罩最好带上

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10楼2016-02-18 17:50:06
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