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墨色尘嚣

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA 提取中 避免RNase 污染问题。 已有8人参与

各位虫友,

我想问一下用trizol 方法提取RNA 时候,装chloroform,isopropanol,75%的 ethanol 的酒精(Rnase free water)的试剂瓶可否用普通的灭菌管来装,因为都是从大容器里面直接倒出到小试剂瓶里分次用,现在有点担心这些装他们的瓶瓶罐罐是否有大问题。另外没有 RNA working station 直接在实验室环境中进行RNA 提取,是否有大问题?
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skull123

木虫 (正式写手)


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提取RNA,用trizol法其实在超净台里就ok了,没有超净台也问题不大。除非你要提取的目标RNA含量非常非常少,不然大部分情况下都ok,使用的时候戴口罩,勤换一次性手套。

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2楼2016-02-17 08:29:09
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skull123

木虫 (正式写手)

试剂最好直接买500ml一瓶未开盖的开盖了直接专一使用,不分装。

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3楼2016-02-17 08:31:06
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skull123

木虫 (正式写手)


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ep管、枪头等耗材也买已经depc处理好的现货使用

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4楼2016-02-17 08:32:03
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a314919473

银虫 (著名写手)


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可以分装试剂,超净台提取即可,放开做就行,别太担心这个那个的。
有你真好
5楼2016-02-18 12:33:13
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flyy1986

铜虫 (小有名气)


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我们这儿有RNA检测试剂盒,不需要提取RNA,两小时内即可出结果。欢迎试用。超级简单!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2016-02-18 14:45:15
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lywac

铜虫 (小有名气)


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最好不要分装,做RNA的和其他的区分开,基本上是没有问题的
等你,是我一生的承诺
7楼2016-02-18 14:58:46
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缝隙中的阳光

银虫 (著名写手)


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记得我提取的时候是没有专门分装的,不过你在提取过程中用到的p管、枪头等耗材都需要用depc水自己处理或者买已经被处理的p管、枪头等耗材。。

另外最好是要在超净工作台上进行,提取过程中勤换手套,戴口罩提取的过程中尽量少说话,另外,在加入反应液反应管静置反应的那段时间最好将反应管放在4°冰箱或者放在冰上这样最好。。

另外每个反应管在使用前,都最好先预冷一下,我是放在液氮中预冷的。。
……
8楼2016-02-18 15:25:26
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zzhua94

金虫 (初入文坛)


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所用的枪头和EP管最好都要经过处理的,另外试剂,离心机等也是提RNA专用的,在超净工作台内,冰上提取比较好,动作要快。

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9楼2016-02-18 16:34:25
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nieyuan1s

铜虫 (小有名气)


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最好与RNA接触的器材都需要DEPC或者NAOH处理去核酶的。溶液有的需要提前预冷。口罩最好带上

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10楼2016-02-18 17:50:06
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