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夏末小贝

铁虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量内参和目的基因的CT值都偏高,结果会可靠吗? 已有3人参与

做了两次荧光定量,内参和目的基因的溶解曲线峰都很好,单一峰,实验重复性也在0.3之内。但是内参和目的基因的CT值都在30-38,33-39之间,请问这样的结果可靠吗?内参CT值和目的基因CT值的差值平均值都在1-5之间。
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haohaoxuexi,tiantianxiangshang
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议增加cDNA浓度,将CT值降到15-30之间比较可靠。
2楼2016-02-04 15:36:00
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werq63

金虫 (著名写手)

是不是RNA浓度太低,我一般都是,rna加倍,反转录时间加倍

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3楼2016-02-04 19:08:11
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joeming123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大于35就不可靠了
现在的路越来越难走
4楼2016-02-06 09:18:31
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们的规定是大于Ct38,即使出峰,也判阴性
5楼2016-02-15 15:16:02
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jackyoung

新虫 (正式写手)

有没有调过基线?引物括增效率如何?这个数值一般来说不能接受,但如果是特殊情况可以有其它方法。

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CestLaVie
6楼2016-02-15 23:43:55
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