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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量内参和目的基因的CT值都偏高，结果会可靠吗？
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夏末小贝

铁虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量内参和目的基因的CT值都偏高，结果会可靠吗？ 已有3人参与

做了两次荧光定量，内参和目的基因的溶解曲线峰都很好，单一峰，实验重复性也在0.3之内。但是内参和目的基因的CT值都在30-38,33-39之间，请问这样的结果可靠吗？内参CT值和目的基因CT值的差值平均值都在1-5之间。
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haohaoxuexi,tiantianxiangshang
1楼 2016-02-04 15:15:26
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议增加cDNA浓度，将CT值降到15-30之间比较可靠。
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2楼2016-02-04 15:36:00
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werq63

金虫 (著名写手)
是不是RNA浓度太低，我一般都是，rna加倍，反转录时间加倍

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3楼2016-02-04 19:08:11
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joeming123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大于35就不可靠了
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现在的路越来越难走
4楼2016-02-06 09:18:31
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们的规定是大于Ct38，即使出峰，也判阴性
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5楼2016-02-15 15:16:02
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jackyoung

新虫 (正式写手)
有没有调过基线？引物括增效率如何？这个数值一般来说不能接受，但如果是特殊情况可以有其它方法。

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CestLaVie
6楼2016-02-15 23:43:55
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