| 查看: 2630 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
小鼠脾细胞Th流式CD4染色极少怎么破… 已有2人参与
|
||
|
感觉做Th流式CD4+一直非常少，求大神讲解，下面是大概的流程… 淋巴细胞分离液处理的Balb/c正常小鼠脾细胞，大概1*10^6／ml，24孔板每孔1ml做刺激: PMA 50ng／ml, Ionomycin 1ug／ml, Golgistop 照BD说明书加的，刺激时间一般6~8h。第二天收了以后胞外染色、固定穿透、胞内染色。固定穿透用的是ebioscience的permeabilization buffer和fixation/ permeabilizaton concentrate，流式抗体都是ebioscience的(CD4,IL4, IFNr)。重复了几次下来都存在CD4+极少甚至染不上(0.5%以下，很多0.1%不到)。 请问这种染色效率是否正常？看到过一种说法是刺激物会引起CD4的表达量减少和内吞，这种情况在实验过程里应该怎么避免？CD3+CD8-作为CD4+的替代标记这种做法在小鼠细胞实验里是否能够得到认可？ 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
化工专硕348，一志愿985求调剂
已经有6人回复
-
292求调剂
已经有3人回复
-
317一志愿华南理工电气工程求调剂
已经有3人回复
-
304求调剂
已经有4人回复
-
290求调剂
已经有6人回复
-
295求调剂
已经有5人回复
-
26申博
已经有4人回复
-
材料学调剂
已经有5人回复
-
264求调剂
已经有3人回复
-
311求调剂
已经有8人回复
6楼2016-04-01 14:01:06
徐州往事
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 6069.1
- 红花: 5
- 帖子: 390
- 在线: 108.6小时
- 虫号: 900173
- 注册: 2009-11-11
- 性别: GG
- 专业: 炎症、感染与免疫
2楼2016-02-04 00:46:23
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2016-03-03 21:22:55
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2016-03-03 21:25:24
