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兜圈圈的幸福

新虫 (小有名气)

[求助] 做了七八十板定量,什么问题都碰到过了,就是不知道原因 已有1人参与

有没有知道这是出现了什么问题?

做了七八十板定量,什么问题都碰到过了,就是不知道原因


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兜圈圈的幸福

新虫 (小有名气)

求助啊,样品太多,做下去就是烧钱,可是就是不知道原因啊

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2楼2016-01-26 16:32:13
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丝竹睛明

新虫 (小有名气)

你这个溶解曲线有杂峰了,引物不行的吧

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3楼2016-01-26 16:45:48
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兜圈圈的幸福

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 丝竹睛明 at 2016-01-26 16:45:48
你这个溶解曲线有杂峰了,引物不行的吧

不同模板跑出来的峰不一样,这是另一板,同一对引物,是引物的问题吗
做了七八十板定量,什么问题都碰到过了,就是不知道原因-1



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4楼2016-01-26 16:47:21
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丝竹睛明

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 兜圈圈的幸福 at 2016-01-26 16:47:21
不同模板跑出来的峰不一样,这是另一板,同一对引物,是引物的问题吗

...

一般来说,起峰在80之前基本是二聚体,你这个前面的起峰比目的带还高,你把定量完的跑个胶,估计是有杂带或者二聚体的。换引物吧。你的引物没有半定量筛选吧(普通pcr跑胶看条带是否单一,然后再上机筛选,筛选好了再正式上样)?

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5楼2016-01-26 17:24:44
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兜圈圈的幸福

新虫 (小有名气)

又跑了一板,是引物问题,是小老板要用的数据,着急做,哎,又烧了好多钱

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6楼2016-01-26 17:28:43
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魚仔守衛

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个图Tm值有90度,这么高啊。下面的图示明显非特异扩增了。还有楼主也没说清楚是遇到什么问题了。
7楼2016-01-27 19:48:50
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