24小时热门版块排行榜    

查看: 2020  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

402222903

木虫 (正式写手)

[求助] 请教关于用大肠杆菌破碎液催化后反应液中蛋白怎么可以较快去掉 已有4人参与

各位大神,本人最近在做用重组大肠杆菌发酵产酶破碎液催化的中试,现在每次催化完反应液,过滤非常慢,尝试过三足式离心机,压滤,加氯化钙絮凝抽滤,加硅藻土抽滤,都非常缓慢,请问各位大神在做大肠杆菌细胞破碎液催化时,此类问题是怎么解决的啊,目前只做到500L的反应,都非常难,估计做更大规模的就更难了,望赐教
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

402222903

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2016-01-27 09:31:33
陶瓷膜,另外产物若是小分子,就加一些蛋白变性剂,或者煮一下让蛋白变性絮凝,在过滤或离心,看你的产物是啥。

或者反应完了先萃取,再在萃取液里面处理,比如旋蒸啊之类的。以前做双歧杆菌转化甾醇的那个项目, ...

产物是小分子,两三百的分子量,尝试过加氯化钙絮凝,但是效果不佳,变性剂有哪些呢?还有,做萃取啊,我后面以前是在过滤过后加足量食言,加等量醇类萃取的,后面旋蒸的,再结晶,如果按照你说的先做萃取会不会出现严重乳化啊?谢谢
5楼2016-01-27 21:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

a2703521

金虫 (小有名气)

123

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
402222903: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-01-27 21:27:39
用微滤和超滤系统,有相关的设备可以购买。500L一个小时都不要就搞定了,而且蛋白的去除量应该能做到99%以上,残余蛋白少于1%
2楼2016-01-26 16:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
402222903: 金币+6, ★★★很有帮助 2016-01-27 21:24:26
陶瓷膜,另外产物若是小分子,就加一些蛋白变性剂,或者煮一下让蛋白变性絮凝,在过滤或离心,看你的产物是啥。

或者反应完了先萃取,再在萃取液里面处理,比如旋蒸啊之类的。以前做双歧杆菌转化甾醇的那个项目,就是转化完,然后萃取出来,然后旋蒸完事,纯度95%是有的。祝顺利
3楼2016-01-27 09:31:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

萃取用的有机溶剂可以重复使用,不用增加多少成本的
4楼2016-01-27 09:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +8 documentary 2026-08-10 8/400 2026-08-10 19:20 by loufangrui
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 帮忙看看fileCode +3 wwncly 2026-08-10 5/250 2026-08-10 19:06 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见