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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ccat1994

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何验证感受态细胞是否染菌 已有2人参与

最近做实验，用蓝白斑筛先筛出转化子，然后接着做平行转板和菌落pcr验证，结果发现菌落pcr验出来的菌对应的转板上的菌落变蓝了！并且感觉是单克隆的形态。觉得很奇怪，所以我在下次做的时候，验证了一下感受态是否被污染，就做了两个操作：1，直接将负80℃取出的感受态涂布到抗性板上，看是否生长。2，将空载体导入感受态中转化涂板。结果是：1，抗性板上无菌生长。2，转化出的空载几乎全是白的，而不是蓝的！ 我觉得这两个结果很矛盾，所以我想问问是不是我验证有问题

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1楼 2016-01-24 22:43:00
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转化后，然后抗性平皿涂板。
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2楼2016-01-25 09:14:30
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ccat1994

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2016-01-25 09:14:30
转化后，然后抗性平皿涂板。

我这样做过，但是在抗性板我同时添加了iptg和xgal，长出来的几乎都是白菌落

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3楼2016-01-25 09:16:58
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
仔细看看载体结构，是不是你没有用载体设计的插入位点。
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4楼2016-01-26 17:18:27
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丝竹睛明

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-01-26 17:18:27
仔细看看载体结构，是不是你没有用载体设计的插入位点。

想多了，一般不会污染的

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5楼2016-01-26 17:45:06
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小妖宝宝

金虫 (小有名气)
添加xgal后，长出来的菌可能出现假阳性，也就是说白斑不一定都是转化成功的，蓝斑也不定都是没有转化的……建议不加xgal,转化后随机挑选菌落直接做pcr和双酶切检验

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淡淡的呼吸···
6楼2016-01-26 17:54:47
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