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如何验证感受态细胞是否染菌 已有2人参与
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最近做实验,用蓝白斑筛先筛出转化子,然后接着做平行转板和菌落pcr验证,结果发现菌落pcr验出来的菌对应的转板上的菌落变蓝了!并且感觉是单克隆的形态。觉得很奇怪,所以我在下次做的时候,验证了一下感受态是否被污染,就做了两个操作:1,直接将负80℃取出的感受态涂布到抗性板上,看是否生长。2,将空载体导入感受态中转化涂板。结果是:1,抗性板上无菌生长。2,转化出的空载几乎全是白的,而不是蓝的! 我觉得这两个结果很矛盾,所以我想问问是不是我验证有问题 发自小木虫Android客户端 |
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添加xgal后,长出来的菌可能出现假阳性,也就是说白斑不一定都是转化成功的,蓝斑也不定都是没有转化的……建议不加xgal,转化后随机挑选菌落直接做pcr和双酶切检验 发自小木虫Android客户端 |

6楼2016-01-26 17:54:47












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