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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » tricine-sds-page凝胶电泳一大堆问题。求帮忙解决
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tan123456

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 15895812751 at 2016-02-29 20:22:53
甘油20％吧

我看了一下我买的上样缓冲液里面有甘油。。那我再补加一点试试吧。。谢谢了
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11楼2016-02-29 21:27:39
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tan123456

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 15895812751 at 2016-02-29 20:22:53
甘油20％吧

应该是我的乙醇含量太高了。。。我是用乙醇提的蛋白。。所以可能导致密度偏小了。我打算多加点上样缓冲液试试吧。。。
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12楼2016-03-01 10:20:44
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小研来报到

金虫 (小有名气)
Tricine-SDS-PAGE的电泳装置和常规SDS-PAGE的装置是一样吗？
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13楼2016-05-16 10:07:12
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Mr童先森

新虫 (正式写手)
你用的是哪家试剂盒阿

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进步
14楼2016-05-21 12:30:28
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袁小小然

银虫 (正式写手)
请问尿素胶里面 16%T，6%C是什么意思啊？ T和C分别指代什么啊啊？
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无
15楼2017-05-25 21:33:52
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real-times

新虫 (初入文坛)
你买的那个试剂盒只是组合了各种成分，没有了解原理。电泳缓冲液用一种就可以，1×Tris-Tricine-SDS

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16楼2017-05-27 10:37:38
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real-times

新虫 (初入文坛)
T只分离胶浓度，就是我们常说的多大浓度的胶，C只交联度，是甲叉占的百分比，C越大，分子筛作用越明显，小肽一般是5%,常规是3.3%

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17楼2017-05-27 10:41:13
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real-times

新虫 (初入文坛)
漂样是loloading中助沉剂加的不够。我一般都是100伏以上通跑，按照你的说明书电泳4，5个小时的

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18楼2017-05-27 10:43:58
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小菜搞研究

新虫 (初入文坛)
先100v半个小时左右再140v跑到底

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19楼2017-05-28 00:24:55
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fangyuan_125

新虫 (初入文坛)
样品沉不下去可以多加点甘油，点样的时候枪头尖部不要有空气，不然点样会产生气泡，气泡浮起会把样品也带上去。电压应该是30V跑，等样品完全从孔里进到浓缩胶以后就可换成200V，全程200V直到快跑到底的时候再换成300V，其实换成200V以后，就是电压越大不同大小的蛋白分得越开，并不是电压小就好。这样全程2h左右。这样跑1KD和4KD的marker也能清晰分开，祝好运！

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20楼2017-06-19 23:37:34
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